中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2011年
1期
71-75
,共5页
张银旭%刘晓梅%左腾%刘宇%张俊华
張銀旭%劉曉梅%左騰%劉宇%張俊華
장은욱%류효매%좌등%류우%장준화
肿瘤相关巨噬细胞%SW620细胞%共培养%增殖%凋亡
腫瘤相關巨噬細胞%SW620細胞%共培養%增殖%凋亡
종류상관거서세포%SW620세포%공배양%증식%조망
目的 研究肿瘤相关巨噬细胞(TAM)对人结肠癌SW620细胞生物学功能的影响.方法 采用白细胞介素(IL)- 4体外诱导人M2型巨噬细胞,Western blot检测其标志分子CD68、巨噬细胞甘露糖受体(MMR)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况.Transwell非接触式共培养TAM和SW620细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测TAM分泌的细胞因子IL-10、IL-12、IL-23和转化生长因子-β(TGF-β)水平;活性凝胶电泳迁移分析法(EMSA)检测SW620细胞中核因子-κB(NF-κB)活性;四氮甲唑蓝法(XTT)和荧光激活细胞分选术(FACS)双标记法分别检测培养后SW620细胞的增殖和凋亡情况.结果 IL- 4诱导的人M2型巨噬细胞可表达CD68和MMR,不表达iNOS.SW620与M2型巨噬细胞共培养24、48h后,培养上清液中M2型巨噬细胞分泌的IL-10和TGF-β水平较培养前明显升高(P均＜0.01),IL-12和IL-23水平与培养前差异无统计学意义(P均＞0.05).与M2型巨噬细胞共培养24、48h后,SW620的NF-κB DNA结合活性较培养前分别降低了72%和75%(P均＜0.01),细胞增殖活性分别下降了48%和59%(P均＜0.01);凋亡率分别为6.37%和7.68%,明显高于对照组的0.37%(P均＜0.01).结论 TAM可能通过抑制SW620细胞的NF-κB活性,抑制SW620细胞增殖,促进SW620细胞凋亡.
目的 研究腫瘤相關巨噬細胞(TAM)對人結腸癌SW620細胞生物學功能的影響.方法 採用白細胞介素(IL)- 4體外誘導人M2型巨噬細胞,Western blot檢測其標誌分子CD68、巨噬細胞甘露糖受體(MMR)和誘導型一氧化氮閤酶(iNOS)的錶達情況.Transwell非接觸式共培養TAM和SW620細胞,酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測TAM分泌的細胞因子IL-10、IL-12、IL-23和轉化生長因子-β(TGF-β)水平;活性凝膠電泳遷移分析法(EMSA)檢測SW620細胞中覈因子-κB(NF-κB)活性;四氮甲唑藍法(XTT)和熒光激活細胞分選術(FACS)雙標記法分彆檢測培養後SW620細胞的增殖和凋亡情況.結果 IL- 4誘導的人M2型巨噬細胞可錶達CD68和MMR,不錶達iNOS.SW620與M2型巨噬細胞共培養24、48h後,培養上清液中M2型巨噬細胞分泌的IL-10和TGF-β水平較培養前明顯升高(P均＜0.01),IL-12和IL-23水平與培養前差異無統計學意義(P均＞0.05).與M2型巨噬細胞共培養24、48h後,SW620的NF-κB DNA結閤活性較培養前分彆降低瞭72%和75%(P均＜0.01),細胞增殖活性分彆下降瞭48%和59%(P均＜0.01);凋亡率分彆為6.37%和7.68%,明顯高于對照組的0.37%(P均＜0.01).結論 TAM可能通過抑製SW620細胞的NF-κB活性,抑製SW620細胞增殖,促進SW620細胞凋亡.
목적 연구종류상관거서세포(TAM)대인결장암SW620세포생물학공능적영향.방법 채용백세포개소(IL)- 4체외유도인M2형거서세포,Western blot검측기표지분자CD68、거서세포감로당수체(MMR)화유도형일양화담합매(iNOS)적표체정황.Transwell비접촉식공배양TAM화SW620세포,매련면역흡부법(ELISA)검측TAM분비적세포인자IL-10、IL-12、IL-23화전화생장인자-β(TGF-β)수평;활성응효전영천이분석법(EMSA)검측SW620세포중핵인자-κB(NF-κB)활성;사담갑서람법(XTT)화형광격활세포분선술(FACS)쌍표기법분별검측배양후SW620세포적증식화조망정황.결과 IL- 4유도적인M2형거서세포가표체CD68화MMR,불표체iNOS.SW620여M2형거서세포공배양24、48h후,배양상청액중M2형거서세포분비적IL-10화TGF-β수평교배양전명현승고(P균＜0.01),IL-12화IL-23수평여배양전차이무통계학의의(P균＞0.05).여M2형거서세포공배양24、48h후,SW620적NF-κB DNA결합활성교배양전분별강저료72%화75%(P균＜0.01),세포증식활성분별하강료48%화59%(P균＜0.01);조망솔분별위6.37%화7.68%,명현고우대조조적0.37%(P균＜0.01).결론 TAM가능통과억제SW620세포적NF-κB활성,억제SW620세포증식,촉진SW620세포조망.
