郑州大学学报(理学版)
鄭州大學學報(理學版)
정주대학학보(이학판)
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
3期
108-113
,共6页
宋安东%张沙沙%裴广庆%谢慧%王风芹
宋安東%張沙沙%裴廣慶%謝慧%王風芹
송안동%장사사%배엄경%사혜%왕풍근
嗜鞣管囊酵母P-01%adh2基因%原核表达%pET-20b-adh2
嗜鞣管囊酵母P-01%adh2基因%原覈錶達%pET-20b-adh2
기유관낭효모P-01%adh2기인%원핵표체%pET-20b-adh2
通过对不同酵母乙醇脱氢酶Ⅱ基因的多重同源性分析比对,克隆出嗜鞣管囊酵母P-01(Pachysolen tannophilus)乙醇脱氢酶Ⅱ基因的一段长为340 bp的片段(EU570211).利用RACE技术,扩增出嗜鞣管囊酵母P-01 adh2基因的全长ORF(1 056 bp).将基因与pMD18-T载体连接,验证后测序.经酶切、酶连到表达载体pET-20b并成功构建了基因的原核表达载体pET-20b-adh2,在E.coli BL21(DE3)中诱导表达出adh2重组蛋白,主要以包涵体的形式存在,预期大小约为35 kD.
通過對不同酵母乙醇脫氫酶Ⅱ基因的多重同源性分析比對,剋隆齣嗜鞣管囊酵母P-01(Pachysolen tannophilus)乙醇脫氫酶Ⅱ基因的一段長為340 bp的片段(EU570211).利用RACE技術,擴增齣嗜鞣管囊酵母P-01 adh2基因的全長ORF(1 056 bp).將基因與pMD18-T載體連接,驗證後測序.經酶切、酶連到錶達載體pET-20b併成功構建瞭基因的原覈錶達載體pET-20b-adh2,在E.coli BL21(DE3)中誘導錶達齣adh2重組蛋白,主要以包涵體的形式存在,預期大小約為35 kD.
통과대불동효모을순탈경매Ⅱ기인적다중동원성분석비대,극륭출기유관낭효모P-01(Pachysolen tannophilus)을순탈경매Ⅱ기인적일단장위340 bp적편단(EU570211).이용RACE기술,확증출기유관낭효모P-01 adh2기인적전장ORF(1 056 bp).장기인여pMD18-T재체련접,험증후측서.경매절、매련도표체재체pET-20b병성공구건료기인적원핵표체재체pET-20b-adh2,재E.coli BL21(DE3)중유도표체출adh2중조단백,주요이포함체적형식존재,예기대소약위35 kD.