中国酿造
中國釀造
중국양조
CHINA BREWING
2011年
9期
50-55
,共6页
赵沁沁%刘军%徐爱才%欧阳文%闫达中%赵胜军
趙沁沁%劉軍%徐愛纔%歐暘文%閆達中%趙勝軍
조심심%류군%서애재%구양문%염체중%조성군
monellin%酿酒酵母%Plackett-Burman试验设计%响应面法%优化
monellin%釀酒酵母%Plackett-Burman試驗設計%響應麵法%優化
monellin%양주효모%Plackett-Burman시험설계%향응면법%우화
对酿酒酵母工程菌WHF9/monellin在液体培养基中产甜蛋白monellin的条件进行了优化.采用单因子试验筛选出细胞生长培养基的最适碳源为蔗糖,氮源为玉米浆干粉,且应添加微量元素溶液.在此基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响菌体生物量的3个显著因素:蔗糖、玉米浆干粉、微量元素溶液.用最陡爬坡路径逼近最大响应区域后,利用Box-Behnken设计和响应面分析法对显著因素进行优化,得出蔗糖、玉米浆干粉、微量元素溶液的最佳浓度分别为102.2g/L,33.9g/L,4.5mL/L.菌株在优化后的生长培养基中的生物量比在YPD培养基中提高了81.38％.在诱导剂半乳糖最适浓度102.2g/L条件下,菌株在优化后的培养基中monellin的表达量达到226.7mg/L,比在YPG中表达的monellin提高了4.2倍,且表达的monellin具有生物活性.
對釀酒酵母工程菌WHF9/monellin在液體培養基中產甜蛋白monellin的條件進行瞭優化.採用單因子試驗篩選齣細胞生長培養基的最適碳源為蔗糖,氮源為玉米漿榦粉,且應添加微量元素溶液.在此基礎上,利用Plackett-Burman試驗設計篩選齣影響菌體生物量的3箇顯著因素:蔗糖、玉米漿榦粉、微量元素溶液.用最陡爬坡路徑逼近最大響應區域後,利用Box-Behnken設計和響應麵分析法對顯著因素進行優化,得齣蔗糖、玉米漿榦粉、微量元素溶液的最佳濃度分彆為102.2g/L,33.9g/L,4.5mL/L.菌株在優化後的生長培養基中的生物量比在YPD培養基中提高瞭81.38％.在誘導劑半乳糖最適濃度102.2g/L條件下,菌株在優化後的培養基中monellin的錶達量達到226.7mg/L,比在YPG中錶達的monellin提高瞭4.2倍,且錶達的monellin具有生物活性.
대양주효모공정균WHF9/monellin재액체배양기중산첨단백monellin적조건진행료우화.채용단인자시험사선출세포생장배양기적최괄탄원위자당,담원위옥미장간분,차응첨가미량원소용액.재차기출상,이용Plackett-Burman시험설계사선출영향균체생물량적3개현저인소:자당、옥미장간분、미량원소용액.용최두파파로경핍근최대향응구역후,이용Box-Behnken설계화향응면분석법대현저인소진행우화,득출자당、옥미장간분、미량원소용액적최가농도분별위102.2g/L,33.9g/L,4.5mL/L.균주재우화후적생장배양기중적생물량비재YPD배양기중제고료81.38％.재유도제반유당최괄농도102.2g/L조건하,균주재우화후적배양기중monellin적표체량체도226.7mg/L,비재YPG중표체적monellin제고료4.2배,차표체적monellin구유생물활성.
