中国呼吸与危重监护杂志
中國呼吸與危重鑑護雜誌
중국호흡여위중감호잡지
CHINESE JOURANL OF RESPIRATORY AND CRITICAL CARE MEDICINE
2012年
1期
84-88
,共5页
孙志宏%许文兵%朱元珏%张宏%顾培
孫誌宏%許文兵%硃元玨%張宏%顧培
손지굉%허문병%주원각%장굉%고배
转化生长因子β1%上皮-间充质细胞转化%胞外调节激酶1/2
轉化生長因子β1%上皮-間充質細胞轉化%胞外調節激酶1/2
전화생장인자β1%상피-간충질세포전화%포외조절격매1/2
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对Ⅱ型肺泡上皮-间充质转化的作用及与胞外调节激酶1/2(ERK1/2)信号系统的关系.方法 体外培养人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞,分为阴性对照组和TGF-β1处理组(0.05、0.5、5、10 μg/L,作用时间48 h).免疫荧光及Western blot方法检测各组细胞E钙粘素(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vim)和纤维连接蛋白(Fn)的表达.在TGF-β1作用不同时间,采用Western blot及RT-PCR方法检测各组细胞α-SMA、E-cad、Vim、Fn、ERK1/2和p-ERK1/2的表达.结果 与阴性对照组比较,TGF-β1组(5μg/L)α-SMA、Vim、Fn蛋白表达显著升高,而E-cad表达显著降低(P＜0.05).作用6h后,TGF-β1组出现α-SMA mRNA表达显著升高,E-cad显著下降(P＜0.05).作用48 h后,TGF-β1组出现Vim、Fn蛋白表达显著升高,E-cad显著下降(P＜0.01).作用30 min后,TGF-β1组ERK/2磷酸化水平显著升高(P＜0.05).结论 TGF-β1可在体外以浓度和时间依赖方式的诱导A549细胞发生上皮-间充质转化,其机制可能与上调ERK1/2信号转导通路有关.
目的 探討轉化生長因子β1(TGF-β1)對Ⅱ型肺泡上皮-間充質轉化的作用及與胞外調節激酶1/2(ERK1/2)信號繫統的關繫.方法 體外培養人Ⅱ型肺泡上皮細胞來源的A549細胞,分為陰性對照組和TGF-β1處理組(0.05、0.5、5、10 μg/L,作用時間48 h).免疫熒光及Western blot方法檢測各組細胞E鈣粘素(E-cad)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vim)和纖維連接蛋白(Fn)的錶達.在TGF-β1作用不同時間,採用Western blot及RT-PCR方法檢測各組細胞α-SMA、E-cad、Vim、Fn、ERK1/2和p-ERK1/2的錶達.結果 與陰性對照組比較,TGF-β1組(5μg/L)α-SMA、Vim、Fn蛋白錶達顯著升高,而E-cad錶達顯著降低(P＜0.05).作用6h後,TGF-β1組齣現α-SMA mRNA錶達顯著升高,E-cad顯著下降(P＜0.05).作用48 h後,TGF-β1組齣現Vim、Fn蛋白錶達顯著升高,E-cad顯著下降(P＜0.01).作用30 min後,TGF-β1組ERK/2燐痠化水平顯著升高(P＜0.05).結論 TGF-β1可在體外以濃度和時間依賴方式的誘導A549細胞髮生上皮-間充質轉化,其機製可能與上調ERK1/2信號轉導通路有關.
목적 탐토전화생장인자β1(TGF-β1)대Ⅱ형폐포상피-간충질전화적작용급여포외조절격매1/2(ERK1/2)신호계통적관계.방법 체외배양인Ⅱ형폐포상피세포래원적A549세포,분위음성대조조화TGF-β1처리조(0.05、0.5、5、10 μg/L,작용시간48 h).면역형광급Western blot방법검측각조세포E개점소(E-cad)、α-평활기기동단백(α-SMA)、파형단백(Vim)화섬유련접단백(Fn)적표체.재TGF-β1작용불동시간,채용Western blot급RT-PCR방법검측각조세포α-SMA、E-cad、Vim、Fn、ERK1/2화p-ERK1/2적표체.결과 여음성대조조비교,TGF-β1조(5μg/L)α-SMA、Vim、Fn단백표체현저승고,이E-cad표체현저강저(P＜0.05).작용6h후,TGF-β1조출현α-SMA mRNA표체현저승고,E-cad현저하강(P＜0.05).작용48 h후,TGF-β1조출현Vim、Fn단백표체현저승고,E-cad현저하강(P＜0.01).작용30 min후,TGF-β1조ERK/2린산화수평현저승고(P＜0.05).결론 TGF-β1가재체외이농도화시간의뢰방식적유도A549세포발생상피-간충질전화,기궤제가능여상조ERK1/2신호전도통로유관.
