中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2006年
12期
1104-1107
,共4页
陈洁敏%朱于莉%欧元祝%谢红梅%瞿涤
陳潔敏%硃于莉%歐元祝%謝紅梅%瞿滌
진길민%주우리%구원축%사홍매%구조
同源重组%表皮葡萄球菌%生物被膜%icaC%多糖黏附因子
同源重組%錶皮葡萄毬菌%生物被膜%icaC%多糖黏附因子
동원중조%표피포도구균%생물피막%icaC%다당점부인자
目的 构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究.方法 构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后电转化入表皮葡萄球菌1457株.将含重组质粒的表皮葡萄球菌1457株在40℃多次传代,筛选出icaC敲除突变株(△icaC株).检测△icaC株生长曲线,采用微量板半定量法检测细菌生物被膜的形成能力,并采用斑点免疫印迹法检测细菌多糖黏附因子的合成.结果 使用同源重组法敲除表皮葡萄球菌1457株基因组中的icaC基因,△icaC株的生长曲线与表皮葡萄球菌1457株相似,但生物被膜形成能力及细胞外多糖黏附因子含量显著降低.结论 表皮葡萄球菌1457株中icaC基因的缺失对细菌生长无明显影响,但显著降低细胞外多糖黏附因子含量及生物被膜形成能力,为进一步研究表皮葡萄球菌icaC基因在生物被膜形成中的作用奠定基础.
目的 構建錶皮葡萄毬菌icaC陰性突變株,以期穫得僅icaC基因不同而其他遺傳揹景與錶皮葡萄毬菌1457株相同的突變株,對icaC基因產物在細菌形成生物被膜中的作用進行研究.方法 構建同源重組質粒pBT2-△icaC,經金黃色葡萄毬菌RN4220株脩飾後電轉化入錶皮葡萄毬菌1457株.將含重組質粒的錶皮葡萄毬菌1457株在40℃多次傳代,篩選齣icaC敲除突變株(△icaC株).檢測△icaC株生長麯線,採用微量闆半定量法檢測細菌生物被膜的形成能力,併採用斑點免疫印跡法檢測細菌多糖黏附因子的閤成.結果 使用同源重組法敲除錶皮葡萄毬菌1457株基因組中的icaC基因,△icaC株的生長麯線與錶皮葡萄毬菌1457株相似,但生物被膜形成能力及細胞外多糖黏附因子含量顯著降低.結論 錶皮葡萄毬菌1457株中icaC基因的缺失對細菌生長無明顯影響,但顯著降低細胞外多糖黏附因子含量及生物被膜形成能力,為進一步研究錶皮葡萄毬菌icaC基因在生物被膜形成中的作用奠定基礎.
목적 구건표피포도구균icaC음성돌변주,이기획득부icaC기인불동이기타유전배경여표피포도구균1457주상동적돌변주,대icaC기인산물재세균형성생물피막중적작용진행연구.방법 구건동원중조질립pBT2-△icaC,경금황색포도구균RN4220주수식후전전화입표피포도구균1457주.장함중조질립적표피포도구균1457주재40℃다차전대,사선출icaC고제돌변주(△icaC주).검측△icaC주생장곡선,채용미량판반정량법검측세균생물피막적형성능력,병채용반점면역인적법검측세균다당점부인자적합성.결과 사용동원중조법고제표피포도구균1457주기인조중적icaC기인,△icaC주적생장곡선여표피포도구균1457주상사,단생물피막형성능력급세포외다당점부인자함량현저강저.결론 표피포도구균1457주중icaC기인적결실대세균생장무명현영향,단현저강저세포외다당점부인자함량급생물피막형성능력,위진일보연구표피포도구균icaC기인재생물피막형성중적작용전정기출.
