CAJ | 학술논문

背景:既往实验表明,炎性因子与内皮细胞的功能有密切的关系,观察保护和损伤因素对体外培养人血管内皮细胞炎性因子作用的报道较少.目的:实验拟观察姜黄素和肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞分泌核因子κB以及单核细胞趋化蛋白1mRNA的影响.设计、时间及地点:细胞观察实验,于2006-12/2007-08在解放军第四军医大学组织工程实验室完成.材料:健康人脐带由解放车第四军医大学唐都医院提供.内皮细胞培养采用M199完全培养基.方法:实验分为3组,正常对照组为无血清M199培养基;肿瘤坏死因子α组:在正常细胞培养液中加入浓度为10μg/L的肿瘤坏死因子α诱导损伤1.5h;姜黄素组:先在培养液中加入10μg/L的肿瘤坏死因子α30min诱导损伤,再分别加入终浓度为6.25,12.5,25,50,100mg/L的姜黄素孵育1h.主要观察指标:①四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度姜黄素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响.②免疫细胞化学染色法观察胞核内核转录因子κB的表达.③反转录-聚合酶链反应检测单核细胞趋化蛋白1mRNA的表达.结果:姜黄素可以提高肿瘤坏死因子α诱导损伤的人脐静脉内皮细胞活性(P＜0.01),并呈一定剂量依赖性.肿瘤坏死因子α可刺激核因子κBp65表达的强度,姜黄素可以减少核因子κBp65的表达.与正常对照组相比,肿瘤坏死因子α作用30min后,单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量明显增高(p＜0.01);加入不同浓度的姜黄素作用1h后,单核细胞化蛋白1mRNA相对表达量明显减低(P＜0.05, P＜0.01).结论:姜黄素对损伤的内皮细胞具有保护作用,其作用途径可能通过抑制核转录因子κB活性,并下调单核细胞趋化蛋白1mRNA的表达,从而阻滞了单核细胞的聚集.
배경:기왕실험표명,염성인자여내피세포적공능유밀절적관계,관찰보호화손상인소대체외배양인혈관내피세포염성인자작용적보도교소.목적:실험의관찰강황소화종류배사인자α대인제정맥내피세포분비핵인자κB이급단핵세포추화단백1mRNA적영향.설계、시간급지점:세포관찰실험,우2006-12/2007-08재해방군제사군의대학조직공정실험실완성.재료:건강인제대유해방차제사군의대학당도의원제공.내피세포배양채용M199완전배양기.방법:실험분위3조,정상대조조위무혈청M199배양기;종류배사인자α조:재정상세포배양액중가입농도위10μg/L적종류배사인자α유도손상1.5h;강황소조:선재배양액중가입10μg/L적종류배사인자α30min유도손상,재분별가입종농도위6.25,12.5,25,50,100mg/L적강황소부육1h.주요관찰지표:①사갑기우담서염법검측불동농도강황소대인제정맥내피세포증식적영향.②면역세포화학염색법관찰포핵내핵전록인자κB적표체.③반전록-취합매련반응검측단핵세포추화단백1mRNA적표체.결과:강황소가이제고종류배사인자α유도손상적인제정맥내피세포활성(P＜0.01),병정일정제량의뢰성.종류배사인자α가자격핵인자κBp65표체적강도,강황소가이감소핵인자κBp65적표체.여정상대조조상비,종류배사인자α작용30min후,단핵세포추화단백1mRNA상대표체량명현증고(p＜0.01);가입불동농도적강황소작용1h후,단핵세포화단백1mRNA상대표체량명현감저(P＜0.05, P＜0.01).결론:강황소대손상적내피세포구유보호작용,기작용도경가능통과억제핵전록인자κB활성,병하조단핵세포추화단백1mRNA적표체,종이조체료단핵세포적취집.