华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2008年
4期
469-472,475,558
,共6页
万赤丹%王宏博%冯贤松%刘涛%程锐%勾善淼
萬赤丹%王宏博%馮賢鬆%劉濤%程銳%勾善淼
만적단%왕굉박%풍현송%류도%정예%구선묘
解偶联蛋白-2%缺血再灌注损伤%肝细胞
解偶聯蛋白-2%缺血再灌註損傷%肝細胞
해우련단백-2%결혈재관주손상%간세포
目的 探讨解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)的过度表达对人 LO2 肝细胞系缺血再灌注损伤的影响及可能机制.方法 构建 UCP-2 真核表达质粒,转染 LO2 肝细胞并筛选出阳性克隆进行鉴定.将转染重组质粒组和对照组肝细胞进行缺血再灌注处理后,采用原位 Hoechest/PI 染色,荧光显微镜观察细胞损伤情况,Annexin V/PI 双标流式细胞仪检测细胞坏死率、凋亡率和存活率,并检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平.结果 转染重组质粒组细胞在缺血再灌注后遭受的损伤显著重于对照组,转染重组质粒组细胞内 ATP 水平显著低于对照组,细胞坏死率、凋亡率、存活率与对照组细胞比较差异均有显著性意义(P<0.05).结论 肝细胞内 UCP-2 的过度表达加剧了缺血再灌注后细胞内 ATP 的耗竭,导致细胞遭受更为严重的损伤.
目的 探討解偶聯蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)的過度錶達對人 LO2 肝細胞繫缺血再灌註損傷的影響及可能機製.方法 構建 UCP-2 真覈錶達質粒,轉染 LO2 肝細胞併篩選齣暘性剋隆進行鑒定.將轉染重組質粒組和對照組肝細胞進行缺血再灌註處理後,採用原位 Hoechest/PI 染色,熒光顯微鏡觀察細胞損傷情況,Annexin V/PI 雙標流式細胞儀檢測細胞壞死率、凋亡率和存活率,併檢測細胞內三燐痠腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平.結果 轉染重組質粒組細胞在缺血再灌註後遭受的損傷顯著重于對照組,轉染重組質粒組細胞內 ATP 水平顯著低于對照組,細胞壞死率、凋亡率、存活率與對照組細胞比較差異均有顯著性意義(P<0.05).結論 肝細胞內 UCP-2 的過度錶達加劇瞭缺血再灌註後細胞內 ATP 的耗竭,導緻細胞遭受更為嚴重的損傷.
목적 탐토해우련단백-2(uncoupling protein-2,UCP-2)적과도표체대인 LO2 간세포계결혈재관주손상적영향급가능궤제.방법 구건 UCP-2 진핵표체질립,전염 LO2 간세포병사선출양성극륭진행감정.장전염중조질립조화대조조간세포진행결혈재관주처리후,채용원위 Hoechest/PI 염색,형광현미경관찰세포손상정황,Annexin V/PI 쌍표류식세포의검측세포배사솔、조망솔화존활솔,병검측세포내삼린산선감(ATP)、활성양(ROS)、병이철(MDA)수평.결과 전염중조질립조세포재결혈재관주후조수적손상현저중우대조조,전염중조질립조세포내 ATP 수평현저저우대조조,세포배사솔、조망솔、존활솔여대조조세포비교차이균유현저성의의(P<0.05).결론 간세포내 UCP-2 적과도표체가극료결혈재관주후세포내 ATP 적모갈,도치세포조수경위엄중적손상.
