安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
12期
7301-7304
,共4页
何江帅%卢强%李伟%赵晓%冯祥汝%陈义龙
何江帥%盧彊%李偉%趙曉%馮祥汝%陳義龍
하강수%로강%리위%조효%풍상여%진의룡
鲤鱼%白细胞介素-1β%cDNA克隆%鉴定%差异表达分析
鯉魚%白細胞介素-1β%cDNA剋隆%鑒定%差異錶達分析
리어%백세포개소-1β%cDNA극륭%감정%차이표체분석
[目的]进行鲤鱼白细胞介素-1β(IL-1β)全长 cDNA 的克隆、鉴定及其差异表达分析.[方法]利用 DD-RTPCR 方法获得差异表达 cDNA 片段,时有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞 cDNA 文库进行筛选,克隆了鲤鱼 IL-1β的全长 cDNA,并进行了序列分析和差异表达分析.[结果]获得的阳性克隆含有 1 个大小为 831 bp 编码 276 个氨基酸的完整开放阅读框.聚类分析表明,鲤鱼 IL-1β氨基酸序列与日本鲤鱼紧密聚为一支,氨基酸序列的同源性达 95%,之后聚类顺序依次为鲫鱼、斑马鱼、猪、牛、马、人和小鼠.差异表达分析表明,经有丝分裂原刺激后前期(4 h)白细胞中 IL-1β的表达量显著增大,但随着时间推移(12,24 h)并非一直较同期大,表达量总体趋势成峰形.[结论]为进一步研究 IL-1β在体内的表达方式、功能特点和调控机理以及在炎症反应、应急反应和免疫应答的作用机制奠定了基础.
[目的]進行鯉魚白細胞介素-1β(IL-1β)全長 cDNA 的剋隆、鑒定及其差異錶達分析.[方法]利用 DD-RTPCR 方法穫得差異錶達 cDNA 片段,時有絲分裂原刺激的鯉魚外週血白細胞 cDNA 文庫進行篩選,剋隆瞭鯉魚 IL-1β的全長 cDNA,併進行瞭序列分析和差異錶達分析.[結果]穫得的暘性剋隆含有 1 箇大小為 831 bp 編碼 276 箇氨基痠的完整開放閱讀框.聚類分析錶明,鯉魚 IL-1β氨基痠序列與日本鯉魚緊密聚為一支,氨基痠序列的同源性達 95%,之後聚類順序依次為鯽魚、斑馬魚、豬、牛、馬、人和小鼠.差異錶達分析錶明,經有絲分裂原刺激後前期(4 h)白細胞中 IL-1β的錶達量顯著增大,但隨著時間推移(12,24 h)併非一直較同期大,錶達量總體趨勢成峰形.[結論]為進一步研究 IL-1β在體內的錶達方式、功能特點和調控機理以及在炎癥反應、應急反應和免疫應答的作用機製奠定瞭基礎.
[목적]진행리어백세포개소-1β(IL-1β)전장 cDNA 적극륭、감정급기차이표체분석.[방법]이용 DD-RTPCR 방법획득차이표체 cDNA 편단,시유사분렬원자격적리어외주혈백세포 cDNA 문고진행사선,극륭료리어 IL-1β적전장 cDNA,병진행료서렬분석화차이표체분석.[결과]획득적양성극륭함유 1 개대소위 831 bp 편마 276 개안기산적완정개방열독광.취류분석표명,리어 IL-1β안기산서렬여일본리어긴밀취위일지,안기산서렬적동원성체 95%,지후취류순서의차위즉어、반마어、저、우、마、인화소서.차이표체분석표명,경유사분렬원자격후전기(4 h)백세포중 IL-1β적표체량현저증대,단수착시간추이(12,24 h)병비일직교동기대,표체량총체추세성봉형.[결론]위진일보연구 IL-1β재체내적표체방식、공능특점화조공궤리이급재염증반응、응급반응화면역응답적작용궤제전정료기출.
