中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2002年
9期
622-625
,共4页
尹航%汪丽蕙%霍勇%彭旭%夏春芳%唐朝枢
尹航%汪麗蕙%霍勇%彭旭%夏春芳%唐朝樞
윤항%왕려혜%곽용%팽욱%하춘방%당조추
蛋白激酶类%细胞粘附%寡核苷酸类,反义
蛋白激酶類%細胞粘附%寡覈苷痠類,反義
단백격매류%세포점부%과핵감산류,반의
目的研究粘着斑激酶和丝裂原活化蛋白激酶在细胞外基质成分诱导血管平滑肌细胞迁移和增殖中的作用.方法通过纤粘连蛋白(FN)诱导培养的平滑肌细胞迁移和增殖,以免疫沉淀和Western印迹法检测粘着斑激酶(FAK)和丝裂原活化蛋白激酶(p42/44 MAPK)及其磷酸化的表达量.将FAK反义寡核苷酸(ODN)经脂质体转染细胞,观察其对FAK和p42/44MAPK磷酸化、细胞迁移以及增殖的影响.结果不同浓度FN(5、10、20、40、60 μg/ml)在有效诱导平滑肌细胞迁移和增殖时FAK和p42/44MAPK也呈明显表达,20 μg/ml FN可使其磷酸化处于较高的表达量.脂质体可有效地介导ODN转染,转染效率为86.7%±4.5%.转染后FAK以及p42/44MAPK磷酸化表达量明显减少,10、20、40和60 μg/ml FN组迁移细胞数也分别显著减少(23.26%、21.63%、19.31%、17.88%,P<0.05),5~60 μg/ml不同浓度的FN组,细胞增殖减少27.67%~46.67%(P<0.05).结论活化的FAK和p42/44MAPK是细胞外基质诱导平滑肌细胞迁移和增殖的重要信号分子,二者之间存在着密切的联系,由其介导的信号转导促进了这一过程,反义FAK ODN可有效地对此进行抑制.
目的研究粘著斑激酶和絲裂原活化蛋白激酶在細胞外基質成分誘導血管平滑肌細胞遷移和增殖中的作用.方法通過纖粘連蛋白(FN)誘導培養的平滑肌細胞遷移和增殖,以免疫沉澱和Western印跡法檢測粘著斑激酶(FAK)和絲裂原活化蛋白激酶(p42/44 MAPK)及其燐痠化的錶達量.將FAK反義寡覈苷痠(ODN)經脂質體轉染細胞,觀察其對FAK和p42/44MAPK燐痠化、細胞遷移以及增殖的影響.結果不同濃度FN(5、10、20、40、60 μg/ml)在有效誘導平滑肌細胞遷移和增殖時FAK和p42/44MAPK也呈明顯錶達,20 μg/ml FN可使其燐痠化處于較高的錶達量.脂質體可有效地介導ODN轉染,轉染效率為86.7%±4.5%.轉染後FAK以及p42/44MAPK燐痠化錶達量明顯減少,10、20、40和60 μg/ml FN組遷移細胞數也分彆顯著減少(23.26%、21.63%、19.31%、17.88%,P<0.05),5~60 μg/ml不同濃度的FN組,細胞增殖減少27.67%~46.67%(P<0.05).結論活化的FAK和p42/44MAPK是細胞外基質誘導平滑肌細胞遷移和增殖的重要信號分子,二者之間存在著密切的聯繫,由其介導的信號轉導促進瞭這一過程,反義FAK ODN可有效地對此進行抑製.
목적연구점착반격매화사렬원활화단백격매재세포외기질성분유도혈관평활기세포천이화증식중적작용.방법통과섬점련단백(FN)유도배양적평활기세포천이화증식,이면역침정화Western인적법검측점착반격매(FAK)화사렬원활화단백격매(p42/44 MAPK)급기린산화적표체량.장FAK반의과핵감산(ODN)경지질체전염세포,관찰기대FAK화p42/44MAPK린산화、세포천이이급증식적영향.결과불동농도FN(5、10、20、40、60 μg/ml)재유효유도평활기세포천이화증식시FAK화p42/44MAPK야정명현표체,20 μg/ml FN가사기린산화처우교고적표체량.지질체가유효지개도ODN전염,전염효솔위86.7%±4.5%.전염후FAK이급p42/44MAPK린산화표체량명현감소,10、20、40화60 μg/ml FN조천이세포수야분별현저감소(23.26%、21.63%、19.31%、17.88%,P<0.05),5~60 μg/ml불동농도적FN조,세포증식감소27.67%~46.67%(P<0.05).결론활화적FAK화p42/44MAPK시세포외기질유도평활기세포천이화증식적중요신호분자,이자지간존재착밀절적련계,유기개도적신호전도촉진료저일과정,반의FAK ODN가유효지대차진행억제.