中华心血管病杂志
中華心血管病雜誌
중화심혈관병잡지
Chinese Journal of Cardiology
2011年
11期
1039-1043
,共5页
陈亚锋%江洪%龚霞%万敬员
陳亞鋒%江洪%龔霞%萬敬員
진아봉%강홍%공하%만경원
内皮细胞%细胞凋亡%脂蛋白类,LDL%消退素E1
內皮細胞%細胞凋亡%脂蛋白類,LDL%消退素E1
내피세포%세포조망%지단백류,LDL%소퇴소E1
Endothelial cells%Apoptosis%Lipoproteins,LDL%Resolvin E1
目的 研究消退素E1是否对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞损伤有保护作用,并探讨其分子机制.方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分成6组,分别用生理盐水、消退素E1、PI3K抑制剂wortmanin、氧化型低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白+消退素E1、氧化型低密度脂蛋白+消退素E1+ PI3K抑制剂wortmanin处理人脐静脉内皮细胞48 h.随后用噻唑蓝法分析内皮细胞存活率、流式细胞仪检测细胞凋亡率、酶联免疫法分析细胞上清中肿瘤坏死因子-α( TNF-α)含量,酶标仪测量细胞内半胱天冬蛋白酶(caspase)3、9的活性,免疫印迹法检测激活的AKT和血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1( LOX-1)的表达.结果 氧化型低密度脂蛋白组细胞活力显著低于生理盐水组(P＜0.01),细胞凋亡率、TNF-α含量、caspase3和9活性,LOX-1蛋白的表达均显著高于生理盐水组(P均＜0.01).氧化型低密度脂蛋白+消退素E1组细胞凋亡率、TNF-α含量、caspase3和9活性,LOX-1蛋白的表达均显著低于氧化型低密度脂蛋白组(P＜0.01),细胞活力和激活的AKT均显著高于氧化型低密度脂蛋白组(P均＜0.01).氧化型低密度脂蛋白+消退素E1+ PI3K抑制剂wortmanin组的细胞活力和细胞凋亡率、TNF-α含量、caspase3和9活性,LOX-1蛋白的表达均显著高于氧化型低密度脂蛋白+消退素E1组(P＜0.05).结论 消退素E1能有效地抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞凋亡,此作用可能通过PI3 K/Akt信号通路介导.
目的 研究消退素E1是否對氧化型低密度脂蛋白誘導的人臍靜脈內皮細胞損傷有保護作用,併探討其分子機製.方法 將人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)隨機分成6組,分彆用生理鹽水、消退素E1、PI3K抑製劑wortmanin、氧化型低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白+消退素E1、氧化型低密度脂蛋白+消退素E1+ PI3K抑製劑wortmanin處理人臍靜脈內皮細胞48 h.隨後用噻唑藍法分析內皮細胞存活率、流式細胞儀檢測細胞凋亡率、酶聯免疫法分析細胞上清中腫瘤壞死因子-α( TNF-α)含量,酶標儀測量細胞內半胱天鼕蛋白酶(caspase)3、9的活性,免疫印跡法檢測激活的AKT和血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1( LOX-1)的錶達.結果 氧化型低密度脂蛋白組細胞活力顯著低于生理鹽水組(P＜0.01),細胞凋亡率、TNF-α含量、caspase3和9活性,LOX-1蛋白的錶達均顯著高于生理鹽水組(P均＜0.01).氧化型低密度脂蛋白+消退素E1組細胞凋亡率、TNF-α含量、caspase3和9活性,LOX-1蛋白的錶達均顯著低于氧化型低密度脂蛋白組(P＜0.01),細胞活力和激活的AKT均顯著高于氧化型低密度脂蛋白組(P均＜0.01).氧化型低密度脂蛋白+消退素E1+ PI3K抑製劑wortmanin組的細胞活力和細胞凋亡率、TNF-α含量、caspase3和9活性,LOX-1蛋白的錶達均顯著高于氧化型低密度脂蛋白+消退素E1組(P＜0.05).結論 消退素E1能有效地抑製氧化型低密度脂蛋白誘導的內皮細胞凋亡,此作用可能通過PI3 K/Akt信號通路介導.
목적 연구소퇴소E1시부대양화형저밀도지단백유도적인제정맥내피세포손상유보호작용,병탐토기분자궤제.방법 장인제정맥내피세포(HUVEC)수궤분성6조,분별용생리염수、소퇴소E1、PI3K억제제wortmanin、양화형저밀도지단백、양화형저밀도지단백+소퇴소E1、양화형저밀도지단백+소퇴소E1+ PI3K억제제wortmanin처리인제정맥내피세포48 h.수후용새서람법분석내피세포존활솔、류식세포의검측세포조망솔、매련면역법분석세포상청중종류배사인자-α( TNF-α)함량,매표의측량세포내반광천동단백매(caspase)3、9적활성,면역인적법검측격활적AKT화혈응소양양화저밀도지단백수체-1( LOX-1)적표체.결과 양화형저밀도지단백조세포활력현저저우생리염수조(P＜0.01),세포조망솔、TNF-α함량、caspase3화9활성,LOX-1단백적표체균현저고우생리염수조(P균＜0.01).양화형저밀도지단백+소퇴소E1조세포조망솔、TNF-α함량、caspase3화9활성,LOX-1단백적표체균현저저우양화형저밀도지단백조(P＜0.01),세포활력화격활적AKT균현저고우양화형저밀도지단백조(P균＜0.01).양화형저밀도지단백+소퇴소E1+ PI3K억제제wortmanin조적세포활력화세포조망솔、TNF-α함량、caspase3화9활성,LOX-1단백적표체균현저고우양화형저밀도지단백+소퇴소E1조(P＜0.05).결론 소퇴소E1능유효지억제양화형저밀도지단백유도적내피세포조망,차작용가능통과PI3 K/Akt신호통로개도.
Objective To investigate whether Resolvin E1 ( RvE1 ) could protect against ox-LDL-induced injury on human vein vascular endothelial cells and reveal related molecular mechanisms.Methods Human vein vascular endothelial cells were randomly assigned to six groups,which were treated with saline,RvE1,wortmanin,ox-LDL,ox-LDL and RvE1,ox-LDL and RvE1 and wortmanin,respectively.After 48 h,survival rates were determined by MTT,apoptosis rate of cells were determined by flow cytometry,TNF-αt contents were assayed by ELISA,caspase 3 and 9 activities were measured by microplate reader,and the expression of p-AKT and LOX-1 were determined by Western blot.Result Compared with normal saline group,survival rate was markedly decreased and apoptosis rate,TNF-α content,caspase 3 and 9 activities,and the expression of LOX-1 were significantly increased in ox-LDL group ( P ＜ 0.01 ).Survival rate was significantly increased and apoptosis rate,TNF-α content,caspase 3 and 9 activities,and the expression of LOX-1 were significantly decreased in ox-LDL + RyE1 group compared to ox-LDL group (P ＜ 0.01 ),these beneficial effects of RvE1 could be blocked by PI3K inhibitor wortmanin ( P ＜ O.05 ).Conclusion The present data showed that RvE1 could effectively protect against ox-LDL-induced endothelial cell injury,which might be mediated by PI3K-AKT signaling pathway.
