高血压杂志
高血壓雜誌
고혈압잡지
2005年
6期
363-367
,共5页
陈永清%赵连友%郑强荪%李言川%尚福军%李爱国%王斌%于心亚%陈军红
陳永清%趙連友%鄭彊蓀%李言川%尚福軍%李愛國%王斌%于心亞%陳軍紅
진영청%조련우%정강손%리언천%상복군%리애국%왕빈%우심아%진군홍
辛伐他汀%心肌细胞%肥大%蛋白激酶B
辛伐他汀%心肌細胞%肥大%蛋白激酶B
신벌타정%심기세포%비대%단백격매B
目的观察辛伐他汀对血清诱导培养大鼠心肌细胞肥大的影响,探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)途径在辛伐他汀调控心肌细胞肥大中的信号转导作用.方法以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PKB的mRNA和蛋白表达水平.结果(1)15%血清组干预24 h后心肌细胞表面积(1611.16±160.75)μm2显著高于无血清对照组(538.04±118.60)μm2,并有统计学意义(P＜0.01);给予辛伐他汀和血清共同干预后,随着辛伐他汀浓度的增加,心肌细胞表面积呈递减趋势,其中10-5mol/L和10-6mol/L组分别为(799.84±167.70)μm2和(1076.88±199.28)μm2,均显著低于血清组(P＜0.01).(2)在15%血清刺激后,心肌细胞[3H]-亮氨酸掺入率为(2360±106)计数/min·孔,明显高于无血清对照组(1305±92)计数/min·孔,并有统计学意义(P＜0.01);10-5和10-6mol/L辛伐他汀组[3H]-亮氨酸掺入率分别为(1707±101)计数/min·孔和(1962±125)计数/min·孔,均较血清组明显降低(P＜0.01).(3)随着辛伐他汀浓度的增加,心肌细胞ANP的mRNA表达水平逐渐降低,其中10-5和10-6mol/L辛伐他汀组分别为0.29±0.03和0.40±0.03,与单纯血清干预组(0.60±0.03)比较明显降低,差异非常显著(P＜0.01).(4)心肌细胞PKB的mRNA和蛋白表达水平均随辛伐他汀浓度的增加而呈递减趋势,其中10-5、10-6mol/L辛伐他汀组PKB mRNA表达水平为0.28±0.02和0.36±0.03,明显低于血清干预组(0.51±0.03),并有统计学意义(P＜0.01).上述两组PKB蛋白表达水平分别为42.41±2.83和45.68±3.43,也较血清组(60.80±3.49)显著降低(P＜0.01).结论辛伐他汀能够抑制血清诱导的心肌细胞肥大,PKB表达水平下调可能是其分子生物学机制之一.
目的觀察辛伐他汀對血清誘導培養大鼠心肌細胞肥大的影響,探討燐脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)途徑在辛伐他汀調控心肌細胞肥大中的信號轉導作用.方法以培養的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌細胞為實驗模型,應用圖像分析繫統測定心肌細胞錶麵積,[3H]-亮氨痠摻入法測定心肌細胞蛋白閤成速率,逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)檢測心鈉素(ANP)mRNA錶達,RT-PCR和蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測PKB的mRNA和蛋白錶達水平.結果(1)15%血清組榦預24 h後心肌細胞錶麵積(1611.16±160.75)μm2顯著高于無血清對照組(538.04±118.60)μm2,併有統計學意義(P＜0.01);給予辛伐他汀和血清共同榦預後,隨著辛伐他汀濃度的增加,心肌細胞錶麵積呈遞減趨勢,其中10-5mol/L和10-6mol/L組分彆為(799.84±167.70)μm2和(1076.88±199.28)μm2,均顯著低于血清組(P＜0.01).(2)在15%血清刺激後,心肌細胞[3H]-亮氨痠摻入率為(2360±106)計數/min·孔,明顯高于無血清對照組(1305±92)計數/min·孔,併有統計學意義(P＜0.01);10-5和10-6mol/L辛伐他汀組[3H]-亮氨痠摻入率分彆為(1707±101)計數/min·孔和(1962±125)計數/min·孔,均較血清組明顯降低(P＜0.01).(3)隨著辛伐他汀濃度的增加,心肌細胞ANP的mRNA錶達水平逐漸降低,其中10-5和10-6mol/L辛伐他汀組分彆為0.29±0.03和0.40±0.03,與單純血清榦預組(0.60±0.03)比較明顯降低,差異非常顯著(P＜0.01).(4)心肌細胞PKB的mRNA和蛋白錶達水平均隨辛伐他汀濃度的增加而呈遞減趨勢,其中10-5、10-6mol/L辛伐他汀組PKB mRNA錶達水平為0.28±0.02和0.36±0.03,明顯低于血清榦預組(0.51±0.03),併有統計學意義(P＜0.01).上述兩組PKB蛋白錶達水平分彆為42.41±2.83和45.68±3.43,也較血清組(60.80±3.49)顯著降低(P＜0.01).結論辛伐他汀能夠抑製血清誘導的心肌細胞肥大,PKB錶達水平下調可能是其分子生物學機製之一.
목적관찰신벌타정대혈청유도배양대서심기세포비대적영향,탐토린지선기순3-격매(PI3K)/단백격매B(PKB)도경재신벌타정조공심기세포비대중적신호전도작용.방법이배양적신생Sprague-Dawley(SD)대서심기세포위실험모형,응용도상분석계통측정심기세포표면적,[3H]-량안산참입법측정심기세포단백합성속솔,역전록취합매련식반응(RT-PCR)검측심납소(ANP)mRNA표체,RT-PCR화단백면역인적법(Western blot)검측PKB적mRNA화단백표체수평.결과(1)15%혈청조간예24 h후심기세포표면적(1611.16±160.75)μm2현저고우무혈청대조조(538.04±118.60)μm2,병유통계학의의(P＜0.01);급여신벌타정화혈청공동간예후,수착신벌타정농도적증가,심기세포표면적정체감추세,기중10-5mol/L화10-6mol/L조분별위(799.84±167.70)μm2화(1076.88±199.28)μm2,균현저저우혈청조(P＜0.01).(2)재15%혈청자격후,심기세포[3H]-량안산참입솔위(2360±106)계수/min·공,명현고우무혈청대조조(1305±92)계수/min·공,병유통계학의의(P＜0.01);10-5화10-6mol/L신벌타정조[3H]-량안산참입솔분별위(1707±101)계수/min·공화(1962±125)계수/min·공,균교혈청조명현강저(P＜0.01).(3)수착신벌타정농도적증가,심기세포ANP적mRNA표체수평축점강저,기중10-5화10-6mol/L신벌타정조분별위0.29±0.03화0.40±0.03,여단순혈청간예조(0.60±0.03)비교명현강저,차이비상현저(P＜0.01).(4)심기세포PKB적mRNA화단백표체수평균수신벌타정농도적증가이정체감추세,기중10-5、10-6mol/L신벌타정조PKB mRNA표체수평위0.28±0.02화0.36±0.03,명현저우혈청간예조(0.51±0.03),병유통계학의의(P＜0.01).상술량조PKB단백표체수평분별위42.41±2.83화45.68±3.43,야교혈청조(60.80±3.49)현저강저(P＜0.01).결론신벌타정능구억제혈청유도적심기세포비대,PKB표체수평하조가능시기분자생물학궤제지일.
