CAJ | 학술논문

万方数据

南京大学学报(自然科学版) 남경대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING UNIVERSITY
2004年 1期 1-6 ,共6页

陈于红%朱镇华%刘蓓钫%张菁%傅一工%王石泉%张巍%杨庆%刘建宁

진우홍%주진화%류배방%장정%부일공%왕석천%장외%양경%류건저

组织型人纤溶酶原激活剂变体基因%工程菌%质粒稳定性%表达稳定性組織型人纖溶酶原激活劑變體基因%工程菌%質粒穩定性%錶達穩定性
조직형인섬용매원격활제변체기인%공정균%질립은정성%표체은정성

利用RT-PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR 2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重组表达质粒pET29a/K2tPA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,构成工程菌.经IPTG诱导表达,在40kDa处有一明显表达条带,表达量为约占菌体总蛋白的20%.该菌种在贮存与复苏及传代过程中具有良好的质粒稳定性和表达稳定性.
이용RT-PCR기술,종인제대정맥상피세포중극륭인조직형섬용매원격활제기인,장기접입TA극륭재체PCR 2.1중,경DNA서렬측정후,이해중조질립DNA위모판,용PCR방법획득료인조직형섬용매원격활제결실변체(K2tPA)기인,장기전입pET29a,구건료중조표체질립pET29a/K2tPA,병전화지대장간균BL21(DE3)중,구성공정균.경IPTG유도표체,재40kDa처유일명현표체조대,표체량위약점균체총단백적20%.해균충재저존여복소급전대과정중구유량호적질립은정성화표체은정성.