中华神经外科疾病研究杂志
中華神經外科疾病研究雜誌
중화신경외과질병연구잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROSURGICAL DISEASE RESEARCH
2008年
4期
309-312
,共4页
谢轩贵%YOU Chao
謝軒貴%YOU Chao
사헌귀%YOU Chao
胞嘧啶脱氨酶%胶质细胞瘤%转染%脂质体%基因表达
胞嘧啶脫氨酶%膠質細胞瘤%轉染%脂質體%基因錶達
포밀정탈안매%효질세포류%전염%지질체%기인표체
目的 以含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因的重组表达质粒(recombinant plasmid vector)pCMVCD转染SHG-44胶质瘤细胞,建立胶质瘤嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因治疗系统.方法 体外扩增、酶切鉴定pCMVCD质粒并采用DNA序列测定pCMVCD质粒中的CD基因;改良Eagle培养基(DMEM)培养SHG-44胶质瘤细胞;脂质体lipofectamine2000介导pCMVCD质粒转染SHG-44细胞,G418筛选重组子;免疫细胞化学检测表达情况.结果 测序证实PCMVCD质粒含有CD基因;脂质体成功介导pCMVCD质粒转染SHG-44细胞,获取了抗性细胞克隆(定名SHG-44/CD细胞);免疫细胞化学染色显示SHG-44/CD细胞成功地表达了CD.结论 脂质体介导pCMVCD质粒转染SHG-44细胞的方法简单、高效;成功建立了胶质瘤CD/5-FC自杀基因治疗系统,为后续实验研究打下了基础.
目的 以含胞嘧啶脫氨酶(CD)基因的重組錶達質粒(recombinant plasmid vector)pCMVCD轉染SHG-44膠質瘤細胞,建立膠質瘤嘧啶脫氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自殺基因治療繫統.方法 體外擴增、酶切鑒定pCMVCD質粒併採用DNA序列測定pCMVCD質粒中的CD基因;改良Eagle培養基(DMEM)培養SHG-44膠質瘤細胞;脂質體lipofectamine2000介導pCMVCD質粒轉染SHG-44細胞,G418篩選重組子;免疫細胞化學檢測錶達情況.結果 測序證實PCMVCD質粒含有CD基因;脂質體成功介導pCMVCD質粒轉染SHG-44細胞,穫取瞭抗性細胞剋隆(定名SHG-44/CD細胞);免疫細胞化學染色顯示SHG-44/CD細胞成功地錶達瞭CD.結論 脂質體介導pCMVCD質粒轉染SHG-44細胞的方法簡單、高效;成功建立瞭膠質瘤CD/5-FC自殺基因治療繫統,為後續實驗研究打下瞭基礎.
목적 이함포밀정탈안매(CD)기인적중조표체질립(recombinant plasmid vector)pCMVCD전염SHG-44효질류세포,건립효질류밀정탈안매/5-불포밀정(CD/5-FC)자살기인치료계통.방법 체외확증、매절감정pCMVCD질립병채용DNA서렬측정pCMVCD질립중적CD기인;개량Eagle배양기(DMEM)배양SHG-44효질류세포;지질체lipofectamine2000개도pCMVCD질립전염SHG-44세포,G418사선중조자;면역세포화학검측표체정황.결과 측서증실PCMVCD질립함유CD기인;지질체성공개도pCMVCD질립전염SHG-44세포,획취료항성세포극륭(정명SHG-44/CD세포);면역세포화학염색현시SHG-44/CD세포성공지표체료CD.결론 지질체개도pCMVCD질립전염SHG-44세포적방법간단、고효;성공건립료효질류CD/5-FC자살기인치료계통,위후속실험연구타하료기출.
