高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2008年
7期
761-765
,共5页
刘成%蔡光泽%杨足君%刘新宇%周建平%雷孟平%李霜蓉%任正隆
劉成%蔡光澤%楊足君%劉新宇%週建平%雷孟平%李霜蓉%任正隆
류성%채광택%양족군%류신우%주건평%뢰맹평%리상용%임정륭
粳稻%谷蛋白%突变体%点突变%质谱分析%特异PCR
粳稻%穀蛋白%突變體%點突變%質譜分析%特異PCR
갱도%곡단백%돌변체%점돌변%질보분석%특이PCR
用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对采集于中国、日本、印尼、老挝的42份特异粳稻资源进行了分析.结果显示,在编号为B104的粳稻中有谷蛋白亚家族 GluB 基因沉默现象.将对照材料 B90 的对应蛋白进行回收染色、原位酶解,然后利用电喷雾-四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-IOF-MS)技术进行鉴定分析.用 MASCOT 叩数据库进行比对的结果显示,该蛋白的推测分子量为 54kD,被包括 GluB2、GluB4、GluB7 等基因在内的 GluB 亚家族基因编码.为了深入探讨 CluB 蛋白的突变机制,设计了2对特异引物,以 B90 为对照,用基因组 PCR 方法来钓取并鉴定其中的 GluB4 和 GluB7 基因.鉴定结果表明 GluB7 基因在 DNA 水平上未发生变化,而 GluB4 基因发生了点突变,导致一个氨基酸的变异.研究证实,电喷雾电离质谱(ESI-MS)可以用来辅助解析植物蛋白质的复合体.
用十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)方法對採集于中國、日本、印尼、老撾的42份特異粳稻資源進行瞭分析.結果顯示,在編號為B104的粳稻中有穀蛋白亞傢族 GluB 基因沉默現象.將對照材料 B90 的對應蛋白進行迴收染色、原位酶解,然後利用電噴霧-四極桿飛行時間質譜(ESI-Q-IOF-MS)技術進行鑒定分析.用 MASCOT 叩數據庫進行比對的結果顯示,該蛋白的推測分子量為 54kD,被包括 GluB2、GluB4、GluB7 等基因在內的 GluB 亞傢族基因編碼.為瞭深入探討 CluB 蛋白的突變機製,設計瞭2對特異引物,以 B90 為對照,用基因組 PCR 方法來釣取併鑒定其中的 GluB4 和 GluB7 基因.鑒定結果錶明 GluB7 基因在 DNA 水平上未髮生變化,而 GluB4 基因髮生瞭點突變,導緻一箇氨基痠的變異.研究證實,電噴霧電離質譜(ESI-MS)可以用來輔助解析植物蛋白質的複閤體.
용십이완기류산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)방법대채집우중국、일본、인니、로과적42빈특이갱도자원진행료분석.결과현시,재편호위B104적갱도중유곡단백아가족 GluB 기인침묵현상.장대조재료 B90 적대응단백진행회수염색、원위매해,연후이용전분무-사겁간비행시간질보(ESI-Q-IOF-MS)기술진행감정분석.용 MASCOT 고수거고진행비대적결과현시,해단백적추측분자량위 54kD,피포괄 GluB2、GluB4、GluB7 등기인재내적 GluB 아가족기인편마.위료심입탐토 CluB 단백적돌변궤제,설계료2대특이인물,이 B90 위대조,용기인조 PCR 방법래조취병감정기중적 GluB4 화 GluB7 기인.감정결과표명 GluB7 기인재 DNA 수평상미발생변화,이 GluB4 기인발생료점돌변,도치일개안기산적변이.연구증실,전분무전리질보(ESI-MS)가이용래보조해석식물단백질적복합체.
