海洋与湖沼
海洋與湖沼
해양여호소
OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA
2009年
4期
489-493
,共5页
倪穗%余晓巍%王建平%雷爱莹%曾地刚%吴雄飞
倪穗%餘曉巍%王建平%雷愛瑩%曾地剛%吳雄飛
예수%여효외%왕건평%뢰애형%증지강%오웅비
病毒性出血性败血症病毒%巢式逆转录聚合酶链反应%检测
病毒性齣血性敗血癥病毒%巢式逆轉錄聚閤酶鏈反應%檢測
병독성출혈성패혈증병독%소식역전록취합매련반응%검측
参照鱼类病毒性出血性败血症病毒序列,根据PCR引物设计的原则,设计巢式PCR引物,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对如何快速检测鱼类病毒性出血性败血症病的方法进行了较为系统的研究,并对RT-PCR的反应条件进行了优化.结果表明,巢式RT-PCR扩增获得279bp的特异性片断,阴性对照无扩增条带.巢式RT-PCR扩增出的特异性片段经测序分析,结果证实与报道的序列完全一致.该方法最低可检测出0.1pg的鱼类病毒性出血性败血症病毒RNA.初步建立了VHSV的巢式RT-PCR检测方法,该方法灵敏、特异,可为VHSV的检测提供一个快速、有效的手段.
參照魚類病毒性齣血性敗血癥病毒序列,根據PCR引物設計的原則,設計巢式PCR引物,採用巢式逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)方法,對如何快速檢測魚類病毒性齣血性敗血癥病的方法進行瞭較為繫統的研究,併對RT-PCR的反應條件進行瞭優化.結果錶明,巢式RT-PCR擴增穫得279bp的特異性片斷,陰性對照無擴增條帶.巢式RT-PCR擴增齣的特異性片段經測序分析,結果證實與報道的序列完全一緻.該方法最低可檢測齣0.1pg的魚類病毒性齣血性敗血癥病毒RNA.初步建立瞭VHSV的巢式RT-PCR檢測方法,該方法靈敏、特異,可為VHSV的檢測提供一箇快速、有效的手段.
삼조어류병독성출혈성패혈증병독서렬,근거PCR인물설계적원칙,설계소식PCR인물,채용소식역전록취합매련반응(RT-PCR)방법,대여하쾌속검측어류병독성출혈성패혈증병적방법진행료교위계통적연구,병대RT-PCR적반응조건진행료우화.결과표명,소식RT-PCR확증획득279bp적특이성편단,음성대조무확증조대.소식RT-PCR확증출적특이성편단경측서분석,결과증실여보도적서렬완전일치.해방법최저가검측출0.1pg적어류병독성출혈성패혈증병독RNA.초보건립료VHSV적소식RT-PCR검측방법,해방법령민、특이,가위VHSV적검측제공일개쾌속、유효적수단.
