临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
臨床耳鼻嚥喉頭頸外科雜誌
림상이비인후두경외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL OTORHINOLARYNGOLOGY HEAD AND NECK SURGERY
2010年
15期
703-707
,共5页
蔡鑫章%危维%赵素萍%唐瑶云%贺楚峰%王承龙
蔡鑫章%危維%趙素萍%唐瑤雲%賀楚峰%王承龍
채흠장%위유%조소평%당요운%하초봉%왕승룡
鼻咽肿瘤%血管内皮生长因子%基因治疗%microRNA
鼻嚥腫瘤%血管內皮生長因子%基因治療%microRNA
비인종류%혈관내피생장인자%기인치료%microRNA
目的:观察人工构建的microRNA对鼻咽癌CNE-2细胞VEGF基因表达的调控效应,探讨microR-NA在鼻咽癌基因治疗中的应用前景.方法:构建靶向VEGF基因的microRNA表达质粒,脂质体法转染鼻咽癌CNE-2细胞,RT-PCR检测转染细胞中VEGF基冈的mRNA水平,Western Blotting法观察microRNA对VEGF蛋白表达水平的调控效应,CCK-8比色法检测靶向VEGF的人工构建microRNA对鼻咽癌细胞生长的抑制作用,皮下注射稳定转染microRNA质粒的CNE-2细胞,构建裸鼠移植瘤模型,观察肿瘤牛长情况.结果:在mi-croRNA表达质粒转染CNE-2细胞后,VEGF的mRNA表达水平下调,蛋白表达水平降低,但是光镜和荧光显微镜下的初步观察显示CNE-2细胞牛长未发生变化,以CCK-8比色法检测的细胞增殖抑制率也无明显改变,而在初步的裸鼠移植瘤实验中,发现调控VEGF表达的microRNA重组质粒能有效抑制肿瘤生长.结论:人工构建表达microRNA的质粒,可在鼻咽癌CNE-2细胞中有效F调VEGF基因的表达水平,抑制裸鼠移植瘤的生长,为鼻咽癌基因治疗研究奠定了一定的基础.
目的:觀察人工構建的microRNA對鼻嚥癌CNE-2細胞VEGF基因錶達的調控效應,探討microR-NA在鼻嚥癌基因治療中的應用前景.方法:構建靶嚮VEGF基因的microRNA錶達質粒,脂質體法轉染鼻嚥癌CNE-2細胞,RT-PCR檢測轉染細胞中VEGF基岡的mRNA水平,Western Blotting法觀察microRNA對VEGF蛋白錶達水平的調控效應,CCK-8比色法檢測靶嚮VEGF的人工構建microRNA對鼻嚥癌細胞生長的抑製作用,皮下註射穩定轉染microRNA質粒的CNE-2細胞,構建裸鼠移植瘤模型,觀察腫瘤牛長情況.結果:在mi-croRNA錶達質粒轉染CNE-2細胞後,VEGF的mRNA錶達水平下調,蛋白錶達水平降低,但是光鏡和熒光顯微鏡下的初步觀察顯示CNE-2細胞牛長未髮生變化,以CCK-8比色法檢測的細胞增殖抑製率也無明顯改變,而在初步的裸鼠移植瘤實驗中,髮現調控VEGF錶達的microRNA重組質粒能有效抑製腫瘤生長.結論:人工構建錶達microRNA的質粒,可在鼻嚥癌CNE-2細胞中有效F調VEGF基因的錶達水平,抑製裸鼠移植瘤的生長,為鼻嚥癌基因治療研究奠定瞭一定的基礎.
목적:관찰인공구건적microRNA대비인암CNE-2세포VEGF기인표체적조공효응,탐토microR-NA재비인암기인치료중적응용전경.방법:구건파향VEGF기인적microRNA표체질립,지질체법전염비인암CNE-2세포,RT-PCR검측전염세포중VEGF기강적mRNA수평,Western Blotting법관찰microRNA대VEGF단백표체수평적조공효응,CCK-8비색법검측파향VEGF적인공구건microRNA대비인암세포생장적억제작용,피하주사은정전염microRNA질립적CNE-2세포,구건라서이식류모형,관찰종류우장정황.결과:재mi-croRNA표체질립전염CNE-2세포후,VEGF적mRNA표체수평하조,단백표체수평강저,단시광경화형광현미경하적초보관찰현시CNE-2세포우장미발생변화,이CCK-8비색법검측적세포증식억제솔야무명현개변,이재초보적라서이식류실험중,발현조공VEGF표체적microRNA중조질립능유효억제종류생장.결론:인공구건표체microRNA적질립,가재비인암CNE-2세포중유효F조VEGF기인적표체수평,억제라서이식류적생장,위비인암기인치료연구전정료일정적기출.
