食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2010年
21期
271-274
,共4页
李黄金%陈伟%赵林%柴伟佳%唐伟
李黃金%陳偉%趙林%柴偉佳%唐偉
리황금%진위%조림%시위가%당위
氯霉素%二硫键稳定的单链抗体%高效表达%β-环糊精分子伴侣%复性
氯黴素%二硫鍵穩定的單鏈抗體%高效錶達%β-環糊精分子伴侶%複性
록매소%이류건은정적단련항체%고효표체%β-배호정분자반려%복성
为构建一种食品残留检测用二硫键稳定的抗氯霉素单链抗体(sdsFvCAP).以抗氯霉素抗体可变区基因为模板,通过引物突变PCR在轻链和重链的可变区分别引入一个半胱氨酸定点突变,以重叠延伸PCR组装成sdsFvCAP.在大肠杆菌系统强启动子T7驱动下,sdsFvCAP基因不能单独表达,而通过同义突变降低其5'端序列GC含量则可实现高效表达.表达产物主要以包涵体形式存在,经β-环糊精分子伴侣系统复性可获得亲和力与母本抗体相似的sdsFvCAP.所构建的sdsFvCAP具有取代单克隆抗体用于氯霉素残留检测的潜力.
為構建一種食品殘留檢測用二硫鍵穩定的抗氯黴素單鏈抗體(sdsFvCAP).以抗氯黴素抗體可變區基因為模闆,通過引物突變PCR在輕鏈和重鏈的可變區分彆引入一箇半胱氨痠定點突變,以重疊延伸PCR組裝成sdsFvCAP.在大腸桿菌繫統彊啟動子T7驅動下,sdsFvCAP基因不能單獨錶達,而通過同義突變降低其5'耑序列GC含量則可實現高效錶達.錶達產物主要以包涵體形式存在,經β-環糊精分子伴侶繫統複性可穫得親和力與母本抗體相似的sdsFvCAP.所構建的sdsFvCAP具有取代單剋隆抗體用于氯黴素殘留檢測的潛力.
위구건일충식품잔류검측용이류건은정적항록매소단련항체(sdsFvCAP).이항록매소항체가변구기인위모판,통과인물돌변PCR재경련화중련적가변구분별인입일개반광안산정점돌변,이중첩연신PCR조장성sdsFvCAP.재대장간균계통강계동자T7구동하,sdsFvCAP기인불능단독표체,이통과동의돌변강저기5'단서렬GC함량칙가실현고효표체.표체산물주요이포함체형식존재,경β-배호정분자반려계통복성가획득친화력여모본항체상사적sdsFvCAP.소구건적sdsFvCAP구유취대단극륭항체용우록매소잔류검측적잠력.