作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2011年
6期
998-1004
,共7页
李宁%黄茜%刘燕%赵丹%刘艳%黄占景%张增艳
李寧%黃茜%劉燕%趙丹%劉豔%黃佔景%張增豔
리저%황천%류연%조단%류염%황점경%장증염
小麦-中间偃麦草易位系%小麦黄矮病抗性%cDNA-AFLP%抗病基因类似序列%病毒介导的基因沉默
小麥-中間偃麥草易位繫%小麥黃矮病抗性%cDNA-AFLP%抗病基因類似序列%病毒介導的基因沉默
소맥-중간언맥초역위계%소맥황왜병항성%cDNA-AFLP%항병기인유사서렬%병독개도적기인침묵
利用cDNA-AFLP技术筛选到1个在抗黄矮病的小麦-中间偃麦草易位系YW642中特异表达的小麦抗病基因类似序列(BYDV resistance-related genel,BRG1)的基因片段.利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和RT-PCR技术,从YW642中分离出BRG1基因全长cDNA序列,获得了一个通读的抗病同源基因cDNA序列,编码由645个氨基酸组成的蛋白质,包含1个NB-ARC保守结构域和3个LRR结构域,该蛋白属于nucleotide-site binding,leucine-rich repeats(NBS-LRR)家族.荧光定量或半定量RT-PCR表达分析表明,BRG1在抗病小麦易位系YW642叶片中优势表达,受BYDV的诱导,BYDV接种后48 h表达量最高,BRG1在感病小麦亲本中8601中表达量始终较低,随BYDV接种时间延长呈轻微的下调趋势;而且外源激素水杨酸(SA)与茉莉酸(JA)处理可上调该基因在YW642中的表达.利用病毒介导的基因沉默技术分析了BRG1基因的功能,结果表明该基因沉默的抗病小麦易位系YW642中BYDV相 对含量增加,但未造成抗病性表型显著改变,说明该基因参与抗黄矮病反应,但不是小麦抗黄矮病重要基因.
利用cDNA-AFLP技術篩選到1箇在抗黃矮病的小麥-中間偃麥草易位繫YW642中特異錶達的小麥抗病基因類似序列(BYDV resistance-related genel,BRG1)的基因片段.利用cDNA末耑快速擴增技術(RACE)和RT-PCR技術,從YW642中分離齣BRG1基因全長cDNA序列,穫得瞭一箇通讀的抗病同源基因cDNA序列,編碼由645箇氨基痠組成的蛋白質,包含1箇NB-ARC保守結構域和3箇LRR結構域,該蛋白屬于nucleotide-site binding,leucine-rich repeats(NBS-LRR)傢族.熒光定量或半定量RT-PCR錶達分析錶明,BRG1在抗病小麥易位繫YW642葉片中優勢錶達,受BYDV的誘導,BYDV接種後48 h錶達量最高,BRG1在感病小麥親本中8601中錶達量始終較低,隨BYDV接種時間延長呈輕微的下調趨勢;而且外源激素水楊痠(SA)與茉莉痠(JA)處理可上調該基因在YW642中的錶達.利用病毒介導的基因沉默技術分析瞭BRG1基因的功能,結果錶明該基因沉默的抗病小麥易位繫YW642中BYDV相 對含量增加,但未造成抗病性錶型顯著改變,說明該基因參與抗黃矮病反應,但不是小麥抗黃矮病重要基因.
이용cDNA-AFLP기술사선도1개재항황왜병적소맥-중간언맥초역위계YW642중특이표체적소맥항병기인유사서렬(BYDV resistance-related genel,BRG1)적기인편단.이용cDNA말단쾌속확증기술(RACE)화RT-PCR기술,종YW642중분리출BRG1기인전장cDNA서렬,획득료일개통독적항병동원기인cDNA서렬,편마유645개안기산조성적단백질,포함1개NB-ARC보수결구역화3개LRR결구역,해단백속우nucleotide-site binding,leucine-rich repeats(NBS-LRR)가족.형광정량혹반정량RT-PCR표체분석표명,BRG1재항병소맥역위계YW642협편중우세표체,수BYDV적유도,BYDV접충후48 h표체량최고,BRG1재감병소맥친본중8601중표체량시종교저,수BYDV접충시간연장정경미적하조추세;이차외원격소수양산(SA)여말리산(JA)처리가상조해기인재YW642중적표체.이용병독개도적기인침묵기술분석료BRG1기인적공능,결과표명해기인침묵적항병소맥역위계YW642중BYDV상 대함량증가,단미조성항병성표형현저개변,설명해기인삼여항황왜병반응,단불시소맥항황왜병중요기인.
