CAJ | 학술논문

目的:观察孕酮(PROG)对氧糖剥夺(OGD)PC12细胞活力及葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)表达的影响,在培养细胞证明孕酮抗缺氧缺血损伤的神经保护作用.方法:神经生长因子诱导分化良好的PC12细胞,随机分为3组:(1)正常对照组:常规培养,不进行OGD处理;(2)OGD组:无糖培养基、低氧环境(95%N2和5%CO2持续通气)进行OGD 30 min处理,然后复氧复糖培养24 h;(3)PROG +OGD组:培养液含终浓度为10 nmol/L 孕酮,余同OGD组.WST-8法检测各组PC12细胞的活力;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,判断细胞损伤的程度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PC12细胞GLUT1 mRNA和GLUT3 mRNA表达;Western blotting法检测PC12细胞GLUT3蛋白表达.结果:孕酮可以减轻OGD引起的PC12细胞肿胀,降低LDH漏出,减轻细胞损伤,显著增加OGD组PC12细胞的活力(P<0.01).RT-PCR显示PROG +OGD组GLUT3 mRNA的表达明显高于OGD组(P<0.05),Western blotting显示PROG +OGD组GLUT3蛋白的表达显著高于OGD组(P<0.01).结论:孕酮对体外培养OGD损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能与上调GLUT3蛋白的表达有关.
목적:관찰잉동(PROG)대양당박탈(OGD)PC12세포활력급포도당전운단백3(GLUT3)표체적영향,재배양세포증명잉동항결양결혈손상적신경보호작용.방법:신경생장인자유도분화량호적PC12세포,수궤분위3조:(1)정상대조조:상규배양,불진행OGD처리;(2)OGD조:무당배양기、저양배경(95%N2화5%CO2지속통기)진행OGD 30 min처리,연후복양복당배양24 h;(3)PROG +OGD조:배양액함종농도위10 nmol/L 잉동,여동OGD조.WST-8법검측각조PC12세포적활력;검측배양액중유산탈경매(LDH)적활성,판단세포손상적정도;반전록-취합매련반응(RT-PCR)검측PC12세포GLUT1 mRNA화GLUT3 mRNA표체;Western blotting법검측PC12세포GLUT3단백표체.결과:잉동가이감경OGD인기적PC12세포종창,강저LDH루출,감경세포손상,현저증가OGD조PC12세포적활력(P<0.01).RT-PCR현시PROG +OGD조GLUT3 mRNA적표체명현고우OGD조(P<0.05),Western blotting현시PROG +OGD조GLUT3단백적표체현저고우OGD조(P<0.01).결론:잉동대체외배양OGD손상적PC12세포구유보호작용,기궤제가능여상조GLUT3단백적표체유관.