重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
22期
2240-2241,2244,封2
,共4页
肖莉%肖莉%石清明%毕文杰%苏炳银
肖莉%肖莉%石清明%畢文傑%囌炳銀
초리%초리%석청명%필문걸%소병은
小鼠%中脑神经干细胞%分离%培养
小鼠%中腦神經榦細胞%分離%培養
소서%중뇌신경간세포%분리%배양
目的 改进小鼠中脑神经干细胞(NSCs)分离培养方法.方法 分别采用机械法和酶消化法分离出生1~3 d的小鼠中脑组织,在含体积分数为2% B27及20 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的DMEM/F12培养基中进行原代和传代培养.采用巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、及神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色方法 鉴定NSCs和分化细胞.结果 在含bFGF及B27的DMEM/F12培养基中,可形成悬浮生长Nestin呈阳性的神经球.诱导分化的细胞可见GFAP或NSE免疫反应阳性细胞.机械法较酶消化法可获得较多的NSCs.结论 在DMEM/F12培养基中添加2%B27及20 ng/mL的bFGF可成功获得中脑NSCs,机械法为一种简便而有效的NSCs分离方法.
目的 改進小鼠中腦神經榦細胞(NSCs)分離培養方法.方法 分彆採用機械法和酶消化法分離齣生1~3 d的小鼠中腦組織,在含體積分數為2% B27及20 ng/mL堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的DMEM/F12培養基中進行原代和傳代培養.採用巢蛋白(Nestin)、膠質纖維痠性蛋白(GFAP)、及神經元特異性烯醇化酶(NSE)免疫細胞化學染色方法 鑒定NSCs和分化細胞.結果 在含bFGF及B27的DMEM/F12培養基中,可形成懸浮生長Nestin呈暘性的神經毬.誘導分化的細胞可見GFAP或NSE免疫反應暘性細胞.機械法較酶消化法可穫得較多的NSCs.結論 在DMEM/F12培養基中添加2%B27及20 ng/mL的bFGF可成功穫得中腦NSCs,機械法為一種簡便而有效的NSCs分離方法.
목적 개진소서중뇌신경간세포(NSCs)분리배양방법.방법 분별채용궤계법화매소화법분리출생1~3 d적소서중뇌조직,재함체적분수위2% B27급20 ng/mL감성성섬유세포생장인자(bFGF)적DMEM/F12배양기중진행원대화전대배양.채용소단백(Nestin)、효질섬유산성단백(GFAP)、급신경원특이성희순화매(NSE)면역세포화학염색방법 감정NSCs화분화세포.결과 재함bFGF급B27적DMEM/F12배양기중,가형성현부생장Nestin정양성적신경구.유도분화적세포가견GFAP혹NSE면역반응양성세포.궤계법교매소화법가획득교다적NSCs.결론 재DMEM/F12배양기중첨가2%B27급20 ng/mL적bFGF가성공획득중뇌NSCs,궤계법위일충간편이유효적NSCs분리방법.
