癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2004年
6期
640-644
,共5页
朱晋军%廖威明%李佛保%朱孝峰%周军民%刘宗潮
硃晉軍%廖威明%李彿保%硃孝峰%週軍民%劉宗潮
주진군%료위명%리불보%주효봉%주군민%류종조
骨肉瘤%p33ING1b%足叶乙甙%p53%化疗敏感性
骨肉瘤%p33ING1b%足葉乙甙%p53%化療敏感性
골육류%p33ING1b%족협을대%p53%화료민감성
背景与目的:作为一个新的抑癌基因,ING1与p53有许多相似的生物学功能,如细胞生长抑制、DNA修复、凋亡和化疗敏感性等.本实验目的在于研究p33ING1b对骨肉瘤细胞药物敏感性的影响并探讨其作用机制.方法:瞬时转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,用足叶乙甙(etoposide,VP-16)处理24 h,然后采用台盼蓝拒染法计数活细胞数并计算细胞生长抑制率,流式细胞仪、DAPI染色等方法检测细胞凋亡率,Western blot技术检测p53、p21WAF1、MDM2和Bax蛋白的表达.结果:台盼蓝染色结果表明,瞬时转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,再用VP-16处理24 h,细胞生长抑制率明显增加[(63.1±5.1)%].流式细胞计数和DAPI染色检测结果表明,细胞凋亡率明显增加(62.7%).Western blot检测结果显示,外源性p33 ING1b高表达明显提高了p53及其下游基因p21WAF1和Bax蛋白的表达水平,转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,再用VP-16处理24 h,p53、p21和Bax蛋白表达增加.在各实验组中,MDM2的蛋白表达没有明显变化.结论:p33ING1b能够上调p53蛋白,并上调p53下游因子--p21WAF1和Bax的表达水平,通过p53依赖性凋亡信号通路,提高骨肉瘤细胞U2OS对VP-16的敏感性.
揹景與目的:作為一箇新的抑癌基因,ING1與p53有許多相似的生物學功能,如細胞生長抑製、DNA脩複、凋亡和化療敏感性等.本實驗目的在于研究p33ING1b對骨肉瘤細胞藥物敏感性的影響併探討其作用機製.方法:瞬時轉染p33ING1b進入骨肉瘤細胞株U2OS後,用足葉乙甙(etoposide,VP-16)處理24 h,然後採用檯盼藍拒染法計數活細胞數併計算細胞生長抑製率,流式細胞儀、DAPI染色等方法檢測細胞凋亡率,Western blot技術檢測p53、p21WAF1、MDM2和Bax蛋白的錶達.結果:檯盼藍染色結果錶明,瞬時轉染p33ING1b進入骨肉瘤細胞株U2OS後,再用VP-16處理24 h,細胞生長抑製率明顯增加[(63.1±5.1)%].流式細胞計數和DAPI染色檢測結果錶明,細胞凋亡率明顯增加(62.7%).Western blot檢測結果顯示,外源性p33 ING1b高錶達明顯提高瞭p53及其下遊基因p21WAF1和Bax蛋白的錶達水平,轉染p33ING1b進入骨肉瘤細胞株U2OS後,再用VP-16處理24 h,p53、p21和Bax蛋白錶達增加.在各實驗組中,MDM2的蛋白錶達沒有明顯變化.結論:p33ING1b能夠上調p53蛋白,併上調p53下遊因子--p21WAF1和Bax的錶達水平,通過p53依賴性凋亡信號通路,提高骨肉瘤細胞U2OS對VP-16的敏感性.
배경여목적:작위일개신적억암기인,ING1여p53유허다상사적생물학공능,여세포생장억제、DNA수복、조망화화료민감성등.본실험목적재우연구p33ING1b대골육류세포약물민감성적영향병탐토기작용궤제.방법:순시전염p33ING1b진입골육류세포주U2OS후,용족협을대(etoposide,VP-16)처리24 h,연후채용태반람거염법계수활세포수병계산세포생장억제솔,류식세포의、DAPI염색등방법검측세포조망솔,Western blot기술검측p53、p21WAF1、MDM2화Bax단백적표체.결과:태반람염색결과표명,순시전염p33ING1b진입골육류세포주U2OS후,재용VP-16처리24 h,세포생장억제솔명현증가[(63.1±5.1)%].류식세포계수화DAPI염색검측결과표명,세포조망솔명현증가(62.7%).Western blot검측결과현시,외원성p33 ING1b고표체명현제고료p53급기하유기인p21WAF1화Bax단백적표체수평,전염p33ING1b진입골육류세포주U2OS후,재용VP-16처리24 h,p53、p21화Bax단백표체증가.재각실험조중,MDM2적단백표체몰유명현변화.결론:p33ING1b능구상조p53단백,병상조p53하유인자--p21WAF1화Bax적표체수평,통과p53의뢰성조망신호통로,제고골육류세포U2OS대VP-16적민감성.
