天津医科大学学报
天津醫科大學學報
천진의과대학학보
JOURNAL OF TIANJIN MEDICAL UNIVERSITY
2005年
4期
533-536
,共4页
赵莉莉%汪军梅%刘新宇%赵郁%解用虹
趙莉莉%汪軍梅%劉新宇%趙鬱%解用虹
조리리%왕군매%류신우%조욱%해용홍
外显子拼接%人载脂蛋白CⅡ%基因克隆
外顯子拼接%人載脂蛋白CⅡ%基因剋隆
외현자병접%인재지단백CⅡ%기인극륭
目的:克隆人载脂蛋白CⅡ(ApoCⅡ)成熟肽编码基因.方法:以人基因组DNA为模板,利用聚合酶链反应(PCR)分别扩增ApoCⅡ成熟肽的编码基因外显子3和外显子4,继而采用外显子拼接法,以两种扩增产物为模板再次进行PCR,得到246bp的人ApoCⅡ基因编码片段.将ApoCⅡ基因编码片段重组入载体pUC18,并进行序列测定.结果:PCR扩增得到ApoCⅡ基因编码片段,经测序证实重组入载体pUC18中的ApoCⅡ编码片段的序列与Genbank中所检索到的编码序列完全一致.结论:利用外显子拼接法完成人ApoCⅡ成熟肽基因编码片段的克隆,为基因工程研制有生物活性蛋白提供了可行的技术手段.
目的:剋隆人載脂蛋白CⅡ(ApoCⅡ)成熟肽編碼基因.方法:以人基因組DNA為模闆,利用聚閤酶鏈反應(PCR)分彆擴增ApoCⅡ成熟肽的編碼基因外顯子3和外顯子4,繼而採用外顯子拼接法,以兩種擴增產物為模闆再次進行PCR,得到246bp的人ApoCⅡ基因編碼片段.將ApoCⅡ基因編碼片段重組入載體pUC18,併進行序列測定.結果:PCR擴增得到ApoCⅡ基因編碼片段,經測序證實重組入載體pUC18中的ApoCⅡ編碼片段的序列與Genbank中所檢索到的編碼序列完全一緻.結論:利用外顯子拼接法完成人ApoCⅡ成熟肽基因編碼片段的剋隆,為基因工程研製有生物活性蛋白提供瞭可行的技術手段.
목적:극륭인재지단백CⅡ(ApoCⅡ)성숙태편마기인.방법:이인기인조DNA위모판,이용취합매련반응(PCR)분별확증ApoCⅡ성숙태적편마기인외현자3화외현자4,계이채용외현자병접법,이량충확증산물위모판재차진행PCR,득도246bp적인ApoCⅡ기인편마편단.장ApoCⅡ기인편마편단중조입재체pUC18,병진행서렬측정.결과:PCR확증득도ApoCⅡ기인편마편단,경측서증실중조입재체pUC18중적ApoCⅡ편마편단적서렬여Genbank중소검색도적편마서렬완전일치.결론:이용외현자병접법완성인ApoCⅡ성숙태기인편마편단적극륭,위기인공정연제유생물활성단백제공료가행적기술수단.
