CAJ | 학술논문

本研究针对传染性支气管炎病毒(mv)tl/CH/LDT3/03毒株的N基因(GenBank登录号为AY702975)设计并合成了一对引物,构建组质粒作为阳性标准品,建立了检测IBV核酸的SYBR Green I荧光定量PCR方法.该方法可检测到初始模板中6.45×10 copies/μL的病毒核酸.与常规PCR相比,敏感性高100倍.该检测方法特异性强,与其它禽源病毒如新城疫病毒(NDV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、禽流感病毒(AIV)、马立克氏病毒(MDV)均不发生交叉反应;重复性试验的变异系数小于2.6%.结果表明,本试验建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于传染性支气管炎的临床诊断.同时应用本方法对人工感染IBV的SPF鸡的主要脏器盲肠扁桃体、肾脏、肺和气管进行了病毒RNA定量检测,结果表明,肾脏的病毒含量最高,盲肠扁桃体中病毒持续的时间最长,从而揭示了IBV在SPF鸡体内复制的动态变化,证实了感染鸡的临床表现与病毒滴度的时间相关性.
본연구침대전염성지기관염병독(mv)tl/CH/LDT3/03독주적N기인(GenBank등록호위AY702975)설계병합성료일대인물,구건조질립작위양성표준품,건립료검측IBV핵산적SYBR Green I형광정량PCR방법.해방법가검측도초시모판중6.45×10 copies/μL적병독핵산.여상규PCR상비,민감성고100배.해검측방법특이성강,여기타금원병독여신성역병독(NDV)、전염성후기관염병독(ILTV)、전염성법씨낭병독(IBDV)、금류감병독(AIV)、마립극씨병독(MDV)균불발생교차반응;중복성시험적변이계수소우2.6%.결과표명,본시험건립적형광정량PCR검측방법령민도고、특이성강、중복성호,가용우전염성지기관염적림상진단.동시응용본방법대인공감염IBV적SPF계적주요장기맹장편도체、신장、폐화기관진행료병독RNA정량검측,결과표명,신장적병독함량최고,맹장편도체중병독지속적시간최장,종이게시료IBV재SPF계체내복제적동태변화,증실료감염계적림상표현여병독적도적시간상관성.