西南师范大学学报(自然科学版)
西南師範大學學報(自然科學版)
서남사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTHWEST CHINA NORMAL UNIVERSITY
2008年
5期
91-94
,共4页
郭俊%陈精兰%李凡%黄扬%尹朝先%陈海如
郭俊%陳精蘭%李凡%黃颺%尹朝先%陳海如
곽준%진정란%리범%황양%윤조선%진해여
月季%李坏死环斑病毒%检测%RT-PCR%IC-RT-PCR
月季%李壞死環斑病毒%檢測%RT-PCR%IC-RT-PCR
월계%리배사배반병독%검측%RT-PCR%IC-RT-PCR
针对感染李坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)植株病毒的特异性检测,将DAS-ELISA、RT-PCR方法综合改进、优化,建立了免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)检测PNRSV的方法.该方法采用PNRsV抗体特异性免疫捕获病毒,并根据GenBank中PNRSV序列设计的特异性引物对PN5/PN3进行PCR扩增,得到约760 bp大小的特异性基因片段.扩增产物经克隆测序后,结果表明:产物序列与PNRSV的外壳蛋白编码基冈存在94%～98%的同源性.检测广泛性以及灵敏度比较研究显示,IC-RT-PCR方法能从含量很低的受病样品中检出PNRSV,检测灵敏度与RT-PCR相近,但所检测样品的范围更广,适用于从植物各部位检测低含量的病毒.IC-RT-PCR检测灵敏度比DAS-ELISA方法高出1 000倍.
針對感染李壞死環斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)植株病毒的特異性檢測,將DAS-ELISA、RT-PCR方法綜閤改進、優化,建立瞭免疫捕穫反轉錄PCR(IC-RT-PCR)檢測PNRSV的方法.該方法採用PNRsV抗體特異性免疫捕穫病毒,併根據GenBank中PNRSV序列設計的特異性引物對PN5/PN3進行PCR擴增,得到約760 bp大小的特異性基因片段.擴增產物經剋隆測序後,結果錶明:產物序列與PNRSV的外殼蛋白編碼基岡存在94%～98%的同源性.檢測廣汎性以及靈敏度比較研究顯示,IC-RT-PCR方法能從含量很低的受病樣品中檢齣PNRSV,檢測靈敏度與RT-PCR相近,但所檢測樣品的範圍更廣,適用于從植物各部位檢測低含量的病毒.IC-RT-PCR檢測靈敏度比DAS-ELISA方法高齣1 000倍.
침대감염리배사배반병독(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)식주병독적특이성검측,장DAS-ELISA、RT-PCR방법종합개진、우화,건립료면역포획반전록PCR(IC-RT-PCR)검측PNRSV적방법.해방법채용PNRsV항체특이성면역포획병독,병근거GenBank중PNRSV서렬설계적특이성인물대PN5/PN3진행PCR확증,득도약760 bp대소적특이성기인편단.확증산물경극륭측서후,결과표명:산물서렬여PNRSV적외각단백편마기강존재94%～98%적동원성.검측엄범성이급령민도비교연구현시,IC-RT-PCR방법능종함량흔저적수병양품중검출PNRSV,검측령민도여RT-PCR상근,단소검측양품적범위경엄,괄용우종식물각부위검측저함량적병독.IC-RT-PCR검측령민도비DAS-ELISA방법고출1 000배.
