体内稳定表达HER2多表位基因B16细胞系的建立
체내은정표체HER2다표위기인B16세포계적건립
Establishment of a B16 cell fine stably expressing genes encoding HER2 multiepitope peptides in vivo
  • 万方数据
    细胞与分子免疫学杂志 세포여분자면역학잡지

    2009年 1期 13-15 ,共3页

    李贺%向泽敏%吴秀丽%王莉%卫红飞%万敏%王丽颖%于永利

    리하%향택민%오수려%왕리%위홍비%만민%왕려영%우영리

    小鼠黑色素瘤细胞%HER2%阳离子脂质体 小鼠黑色素瘤細胞%HER2%暘離子脂質體
    소서흑색소류세포%HER2%양리자지질체
    目的:建立体内稳定表达HER2多表位基因的小鼠黑色素瘤B16细胞系.方法:利用分子克隆技术构建真核表达载体peDNA3-GFP-HEK2,阳离子脂质体介导法将其稳定转染入B16细胞,G418克隆筛选及体内传代后,流式细胞术(FCM)分选出GFP-HER2表达阳性细胞群,对该群细胞进行无G418条件下的单克隆筛选并进行体内稳定性检测.结果:经限制性内切酶鉴定及序列分析,peDNA3-GFP-HER2构建正确;最终建立的表达HER2基因B16细胞系体内传代后GFPHER2阳性率高于90%.结论:成功建立了体内稳定表达HER2多表位基因的小鼠黑色素瘤细胞系,为其他体内稳定表达外源基因的转染细胞的建立提供了借鉴.
    목적:건입체내은정표체HER2다표위기인적소서흑색소류B16세포계.방법:이용분자극륭기술구건진핵표체재체peDNA3-GFP-HEK2,양리자지질체개도법장기은정전염입B16세포,G418극륭사선급체내전대후,류식세포술(FCM)분선출GFP-HER2표체양성세포군,대해군세포진행무G418조건하적단극륭사선병진행체내은정성검측.결과:경한제성내절매감정급서렬분석,peDNA3-GFP-HER2구건정학;최종건립적표체HER2기인B16세포계체내전대후GFPHER2양성솔고우90%.결론:성공건립료체내은정표체HER2다표위기인적소서흑색소류세포계,위기타체내은정표체외원기인적전염세포적건립제공료차감.
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