中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2009年
8期
930-933
,共4页
孙弦%周盛年%张明丽%魏先森%刘黎青
孫絃%週盛年%張明麗%魏先森%劉黎青
손현%주성년%장명려%위선삼%류려청
骨髓基质干细胞%基因转染%Noggin%分化%神经细胞
骨髓基質榦細胞%基因轉染%Noggin%分化%神經細胞
골수기질간세포%기인전염%Noggin%분화%신경세포
目的 构建Noggin基因的表达载体,分离骨髓基质干细胞(BMSCs),探讨转染Noggin基因的BMSCs在体外分化为神经元样细胞的情况.方法 应用RT-PCR技术扩增Noggin基因,利用基因工程技术构建载体pCS2+[Tα1]-Noggin,分离、培养大鼠BMSCs,借助脂质体将Noggin基因转入BMSCs.观察诱导后细胞形态变化,利用免疫细胞化学方法 鉴定分化细胞是否表达神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2(MAP-2)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP).利用RT-PCR方法 检测神经细胞标记物mRNA的表达.结果 成功构建Noggin基因的真核表达载体并分离培养BMSCs.转染Noggin基因表达载体后, 分化的BMSCs形态似神经细胞;免疫化学检测到NSE、MAP-2特异性标志物表达,未检测到GFAP表达;RT-PCR测得神经细胞标记物GAP43、NCAM、SYN1表达.结论 从形态、蛋白、基因水平证实转染Noggin基因的BMSCs在体外可以分化为具有部分功能的神经细胞.
目的 構建Noggin基因的錶達載體,分離骨髓基質榦細胞(BMSCs),探討轉染Noggin基因的BMSCs在體外分化為神經元樣細胞的情況.方法 應用RT-PCR技術擴增Noggin基因,利用基因工程技術構建載體pCS2+[Tα1]-Noggin,分離、培養大鼠BMSCs,藉助脂質體將Noggin基因轉入BMSCs.觀察誘導後細胞形態變化,利用免疫細胞化學方法 鑒定分化細胞是否錶達神經細胞特異性烯醇化酶(NSE)、微管相關蛋白-2(MAP-2)以及膠質纖維痠性蛋白(GFAP).利用RT-PCR方法 檢測神經細胞標記物mRNA的錶達.結果 成功構建Noggin基因的真覈錶達載體併分離培養BMSCs.轉染Noggin基因錶達載體後, 分化的BMSCs形態似神經細胞;免疫化學檢測到NSE、MAP-2特異性標誌物錶達,未檢測到GFAP錶達;RT-PCR測得神經細胞標記物GAP43、NCAM、SYN1錶達.結論 從形態、蛋白、基因水平證實轉染Noggin基因的BMSCs在體外可以分化為具有部分功能的神經細胞.
목적 구건Noggin기인적표체재체,분리골수기질간세포(BMSCs),탐토전염Noggin기인적BMSCs재체외분화위신경원양세포적정황.방법 응용RT-PCR기술확증Noggin기인,이용기인공정기술구건재체pCS2+[Tα1]-Noggin,분리、배양대서BMSCs,차조지질체장Noggin기인전입BMSCs.관찰유도후세포형태변화,이용면역세포화학방법 감정분화세포시부표체신경세포특이성희순화매(NSE)、미관상관단백-2(MAP-2)이급효질섬유산성단백(GFAP).이용RT-PCR방법 검측신경세포표기물mRNA적표체.결과 성공구건Noggin기인적진핵표체재체병분리배양BMSCs.전염Noggin기인표체재체후, 분화적BMSCs형태사신경세포;면역화학검측도NSE、MAP-2특이성표지물표체,미검측도GFAP표체;RT-PCR측득신경세포표기물GAP43、NCAM、SYN1표체.결론 종형태、단백、기인수평증실전염Noggin기인적BMSCs재체외가이분화위구유부분공능적신경세포.
