临床儿科杂志
臨床兒科雜誌
림상인과잡지
2009年
7期
673-677
,共5页
脐血%间充质干细胞%细胞增殖%RNA干扰%Bmi-1
臍血%間充質榦細胞%細胞增殖%RNA榦擾%Bmi-1
제혈%간충질간세포%세포증식%RNA간우%Bmi-1
目的 研究Bmi-1基因对脐血间充质干细胞(MSCs)增殖的影响.方法 培养人脐血MSCs,先利用RNA干扰技术抑制第3和6代MSCs Bmi-1基因的表达,用real-time PCR检测Bmi-1基因的表达,免疫组织化学检测BrdU掺入率来观察脐血MSCs增殖的能力;再通过连续传代至细胞增殖能力下降,利用real-time PCR检测Bmi-1基因在细胞增殖能力下降前后表达量的变化.结果 经过RNA干扰后,Bmi-1基因表达量显著减少;RNA干扰后的48 h、96 h、168 h,Bmi-1转录水平分别下降为正常的(28.67.±10.39)%、(24.46±12.15)%、 (32.68.±9.34)%.脐血MSCs的BrdU掺入率在RNA干扰前为(38.97 ±5.02)%,干扰后显著下降为(12.62 ±2.91)%.此外,当脐血MSCs体外连续传至12~15代时,伴随其增殖能力的下降,表现在Brdu掺入率降至(4.18 ±1.53)%,Bmi-1转录水平也显著下降(P<0.01).结论 RNA干扰抑制脐血MSCs Bmi-1基因表达后,细胞增殖能力明显下降;细胞连续体外传代至增殖能力下降后,Bmi-1基因表达显著下降.说明Bmi-1基因在脐血MSCs的增殖过程中发挥重要作用.
目的 研究Bmi-1基因對臍血間充質榦細胞(MSCs)增殖的影響.方法 培養人臍血MSCs,先利用RNA榦擾技術抑製第3和6代MSCs Bmi-1基因的錶達,用real-time PCR檢測Bmi-1基因的錶達,免疫組織化學檢測BrdU摻入率來觀察臍血MSCs增殖的能力;再通過連續傳代至細胞增殖能力下降,利用real-time PCR檢測Bmi-1基因在細胞增殖能力下降前後錶達量的變化.結果 經過RNA榦擾後,Bmi-1基因錶達量顯著減少;RNA榦擾後的48 h、96 h、168 h,Bmi-1轉錄水平分彆下降為正常的(28.67.±10.39)%、(24.46±12.15)%、 (32.68.±9.34)%.臍血MSCs的BrdU摻入率在RNA榦擾前為(38.97 ±5.02)%,榦擾後顯著下降為(12.62 ±2.91)%.此外,噹臍血MSCs體外連續傳至12~15代時,伴隨其增殖能力的下降,錶現在Brdu摻入率降至(4.18 ±1.53)%,Bmi-1轉錄水平也顯著下降(P<0.01).結論 RNA榦擾抑製臍血MSCs Bmi-1基因錶達後,細胞增殖能力明顯下降;細胞連續體外傳代至增殖能力下降後,Bmi-1基因錶達顯著下降.說明Bmi-1基因在臍血MSCs的增殖過程中髮揮重要作用.
목적 연구Bmi-1기인대제혈간충질간세포(MSCs)증식적영향.방법 배양인제혈MSCs,선이용RNA간우기술억제제3화6대MSCs Bmi-1기인적표체,용real-time PCR검측Bmi-1기인적표체,면역조직화학검측BrdU참입솔래관찰제혈MSCs증식적능력;재통과련속전대지세포증식능력하강,이용real-time PCR검측Bmi-1기인재세포증식능력하강전후표체량적변화.결과 경과RNA간우후,Bmi-1기인표체량현저감소;RNA간우후적48 h、96 h、168 h,Bmi-1전록수평분별하강위정상적(28.67.±10.39)%、(24.46±12.15)%、 (32.68.±9.34)%.제혈MSCs적BrdU참입솔재RNA간우전위(38.97 ±5.02)%,간우후현저하강위(12.62 ±2.91)%.차외,당제혈MSCs체외련속전지12~15대시,반수기증식능력적하강,표현재Brdu참입솔강지(4.18 ±1.53)%,Bmi-1전록수평야현저하강(P<0.01).결론 RNA간우억제제혈MSCs Bmi-1기인표체후,세포증식능력명현하강;세포련속체외전대지증식능력하강후,Bmi-1기인표체현저하강.설명Bmi-1기인재제혈MSCs적증식과정중발휘중요작용.