检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2010年
9期
688-692
,共5页
蔡德丰%范建高%陆元善%蔡晓波
蔡德豐%範建高%陸元善%蔡曉波
채덕봉%범건고%륙원선%채효파
硬脂酰辅酶A去饱和酶1%棕榈酸%慢病毒载体%线粒体膜电位
硬脂酰輔酶A去飽和酶1%棕櫚痠%慢病毒載體%線粒體膜電位
경지선보매A거포화매1%종려산%만병독재체%선립체막전위
目的 探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)过表达影响大鼠BRL肝细胞系凋亡作用的可能机制.方法 通过台盼兰染色检测不同浓度棕榈酸(PA)诱导BRL肝细胞死亡率确定下游实验PA添加浓度.培养细胞分组为非加药组和加药组.非加药组包括一般培养组(CON)、一般培养加阴性病毒组(NC)及一般培养加过表达病毒组(SCD1-LV);加药组包括一般培养加PA组(CON+)、一般培养加阴性病毒和PA组(NC+)及一般培养加过表达病毒和PA组(SCD1-LV+) .实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测SCD1 mRNA表达的变化,流式细胞术测细胞线粒体膜电位(MMP)的变化,用膜电位正常细胞百分比(JC-1+%)表示MMP改变.结果 与对照组相比,400 μmol/L PA诱导72 h细胞死亡率明显上升(P<0.01).PA诱导引起CON+及NC+组SCD1表达下降,SCD1-LV+ 组及SCD1-LV组SCD1表达明显上升; CON+和NC+组JC-1+%较低,SCD1-LV+ 组JC-1+%与对照组相似.结论 用SCD1慢病毒载体感染BRL肝细胞系,SCD1表达升高,增强细胞对饱和脂肪酸的去饱和作用,过表达SCD1能降低PA诱导的脂毒性,使紊乱的MMP得到恢复.
目的 探討硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)過錶達影響大鼠BRL肝細胞繫凋亡作用的可能機製.方法 通過檯盼蘭染色檢測不同濃度棕櫚痠(PA)誘導BRL肝細胞死亡率確定下遊實驗PA添加濃度.培養細胞分組為非加藥組和加藥組.非加藥組包括一般培養組(CON)、一般培養加陰性病毒組(NC)及一般培養加過錶達病毒組(SCD1-LV);加藥組包括一般培養加PA組(CON+)、一般培養加陰性病毒和PA組(NC+)及一般培養加過錶達病毒和PA組(SCD1-LV+) .實時熒光定量聚閤酶鏈反應(PCR)檢測SCD1 mRNA錶達的變化,流式細胞術測細胞線粒體膜電位(MMP)的變化,用膜電位正常細胞百分比(JC-1+%)錶示MMP改變.結果 與對照組相比,400 μmol/L PA誘導72 h細胞死亡率明顯上升(P<0.01).PA誘導引起CON+及NC+組SCD1錶達下降,SCD1-LV+ 組及SCD1-LV組SCD1錶達明顯上升; CON+和NC+組JC-1+%較低,SCD1-LV+ 組JC-1+%與對照組相似.結論 用SCD1慢病毒載體感染BRL肝細胞繫,SCD1錶達升高,增彊細胞對飽和脂肪痠的去飽和作用,過錶達SCD1能降低PA誘導的脂毒性,使紊亂的MMP得到恢複.
목적 탐토경지선보매A거포화매1(SCD1)과표체영향대서BRL간세포계조망작용적가능궤제.방법 통과태반란염색검측불동농도종려산(PA)유도BRL간세포사망솔학정하유실험PA첨가농도.배양세포분조위비가약조화가약조.비가약조포괄일반배양조(CON)、일반배양가음성병독조(NC)급일반배양가과표체병독조(SCD1-LV);가약조포괄일반배양가PA조(CON+)、일반배양가음성병독화PA조(NC+)급일반배양가과표체병독화PA조(SCD1-LV+) .실시형광정량취합매련반응(PCR)검측SCD1 mRNA표체적변화,류식세포술측세포선립체막전위(MMP)적변화,용막전위정상세포백분비(JC-1+%)표시MMP개변.결과 여대조조상비,400 μmol/L PA유도72 h세포사망솔명현상승(P<0.01).PA유도인기CON+급NC+조SCD1표체하강,SCD1-LV+ 조급SCD1-LV조SCD1표체명현상승; CON+화NC+조JC-1+%교저,SCD1-LV+ 조JC-1+%여대조조상사.결론 용SCD1만병독재체감염BRL간세포계,SCD1표체승고,증강세포대포화지방산적거포화작용,과표체SCD1능강저PA유도적지독성,사문란적MMP득도회복.
