癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2010年
5期
346-351
,共6页
王革非%彭程%曾祥兴%张驰%李康生
王革非%彭程%曾祥興%張馳%李康生
왕혁비%팽정%증상흥%장치%리강생
APOBEC-3F%APOBEC-3G%流感病毒%复制%突变%A549
APOBEC-3F%APOBEC-3G%流感病毒%複製%突變%A549
APOBEC-3F%APOBEC-3G%류감병독%복제%돌변%A549
目的:研究人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽-3F(human apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic-polypeptide 3F,hA3F)和hA3G对流感病毒的复制和突变的影响.方法:外源性hA3F和hA3G通过脂质体转染至A549和MDCK细胞中,经Western blotting和间接免疫荧光鉴定后,用流感病毒进行感染,通过检测半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50)和空斑实验确定病毒滴度;使用不同初始感染剂量,绘制动态的病毒生长曲线,以确认hA3F和hA3G对流感病毒复制的影响.Western blotting检测流感病毒感染后转染细胞表达外源性hA3F和hA3G的情况.病毒在转染细胞和对照细胞中连续传代,RT-PCR和测序分析其血凝素HA基因的突变频率.结果:TCID50检测和空斑实验结果表明在hA3F和hA3G表达细胞中,流感病毒的滴度与对照细胞间差异无统计学意义(P>0.05);病毒生长曲线表明,不同初始感染剂量、不同感染时相,转染hA3F和hA3G的细胞对人流感病毒的抑制作用与对照细胞间的差异无统计学意义(P>0.05).Western blotting结果表明感染后48 h仍能够在MDCK细胞中检测到hA3F和hA3G的重组蛋白.病毒HA片段的测序分析表明,转染hA3F和hA3G的细胞对流感病毒基因组的致突变频率与埘照细胞间的差异无统计学意义(P>0.05).结论:本研究表明hA3F和hA3G这两个重要的APOBEC成员,对人流感病毒的复制效率及突变频率无明显作用.
目的:研究人載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽-3F(human apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic-polypeptide 3F,hA3F)和hA3G對流感病毒的複製和突變的影響.方法:外源性hA3F和hA3G通過脂質體轉染至A549和MDCK細胞中,經Western blotting和間接免疫熒光鑒定後,用流感病毒進行感染,通過檢測半數組織培養感染劑量(50%tissue culture infective dose,TCID50)和空斑實驗確定病毒滴度;使用不同初始感染劑量,繪製動態的病毒生長麯線,以確認hA3F和hA3G對流感病毒複製的影響.Western blotting檢測流感病毒感染後轉染細胞錶達外源性hA3F和hA3G的情況.病毒在轉染細胞和對照細胞中連續傳代,RT-PCR和測序分析其血凝素HA基因的突變頻率.結果:TCID50檢測和空斑實驗結果錶明在hA3F和hA3G錶達細胞中,流感病毒的滴度與對照細胞間差異無統計學意義(P>0.05);病毒生長麯線錶明,不同初始感染劑量、不同感染時相,轉染hA3F和hA3G的細胞對人流感病毒的抑製作用與對照細胞間的差異無統計學意義(P>0.05).Western blotting結果錶明感染後48 h仍能夠在MDCK細胞中檢測到hA3F和hA3G的重組蛋白.病毒HA片段的測序分析錶明,轉染hA3F和hA3G的細胞對流感病毒基因組的緻突變頻率與塒照細胞間的差異無統計學意義(P>0.05).結論:本研究錶明hA3F和hA3G這兩箇重要的APOBEC成員,對人流感病毒的複製效率及突變頻率無明顯作用.
목적:연구인재지단백B mRNA편집매최화다태-3F(human apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic-polypeptide 3F,hA3F)화hA3G대류감병독적복제화돌변적영향.방법:외원성hA3F화hA3G통과지질체전염지A549화MDCK세포중,경Western blotting화간접면역형광감정후,용류감병독진행감염,통과검측반수조직배양감염제량(50%tissue culture infective dose,TCID50)화공반실험학정병독적도;사용불동초시감염제량,회제동태적병독생장곡선,이학인hA3F화hA3G대류감병독복제적영향.Western blotting검측류감병독감염후전염세포표체외원성hA3F화hA3G적정황.병독재전염세포화대조세포중련속전대,RT-PCR화측서분석기혈응소HA기인적돌변빈솔.결과:TCID50검측화공반실험결과표명재hA3F화hA3G표체세포중,류감병독적적도여대조세포간차이무통계학의의(P>0.05);병독생장곡선표명,불동초시감염제량、불동감염시상,전염hA3F화hA3G적세포대인류감병독적억제작용여대조세포간적차이무통계학의의(P>0.05).Western blotting결과표명감염후48 h잉능구재MDCK세포중검측도hA3F화hA3G적중조단백.병독HA편단적측서분석표명,전염hA3F화hA3G적세포대류감병독기인조적치돌변빈솔여시조세포간적차이무통계학의의(P>0.05).결론:본연구표명hA3F화hA3G저량개중요적APOBEC성원,대인류감병독적복제효솔급돌변빈솔무명현작용.
