CAJ | 학술논문

目的:探讨热休克蛋白HSP90拮抗剂17-烯丙胺基-17-脱甲氧基格尔德霉素(17-aag)对体外结肠癌细胞株SW 1116增值的抑制作用及其作用方式,并分析热休克因子-1(HSF-1)对17-aag诱导凋亡的影响.方法:将不同浓度的17-aag作用于野生型SW1116细胞株24、48、72 h,应用CCK-8法测定各处理组细胞的活性,计算增值抑制效应,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化及细胞凋亡比例.构建针对HSF-1的shRNA质粒,通过瞬转质粒及药物干预的不同将肿瘤细胞分为4组,即HSF-1(-)17-aagG)组、HSF-1(-)17-aag(+)组、HSF-1(+) 17-aag(-)组、HSF-1(+)17-aag(+)组.注:HSF-1(-)代表转染了含目的干扰片段质粒,HSF-1(+)代表转染了空载质粒,17-aag(-)代表未受17-aag干预,17-aag(+)代表受17-aag干预.每组细胞经相应处理后,通过FCM测定各组在处理后的细胞凋亡比例,比较各处理因素对结肠癌细胞株SW1116的杀伤作用.通过Western印迹检测各组中H5P90、HSP70、HSP27的表达量,评价细胞凋亡比例的高低与热休克蛋白的表达量是否有关.结果:17-aag对野生型SW1116细胞增殖具有明显的抑制作用,可诱导G2/M期周期阻滞和细胞凋亡.转染组细胞后,HSF-1(-)17-aag(-)组与HSF-1(+)17-aag(-)组间细胞凋亡比例差异无统计学意义;HSF-1(-)17-aag(+)组较HSF-1(+)17-aag(+)组细胞凋亡比例高,而细胞内HSP90、HSP70、HSP27表达量均较HSF-1(+)17-aag(+)组降低.结论:17-aag可诱导体外结肠癌SW1116细胞发生凋亡和周期阻滞.在干扰HSF-1表达后,17-aag诱导细胞凋亡的作用明显增强.
목적:탐토열휴극단백HSP90길항제17-희병알기-17-탈갑양기격이덕매소(17-aag)대체외결장암세포주SW 1116증치적억제작용급기작용방식,병분석열휴극인자-1(HSF-1)대17-aag유도조망적영향.방법:장불동농도적17-aag작용우야생형SW1116세포주24、48、72 h,응용CCK-8법측정각처리조세포적활성,계산증치억제효응,응용류식세포의(FCM)검측세포주기변화급세포조망비례.구건침대HSF-1적shRNA질립,통과순전질립급약물간예적불동장종류세포분위4조,즉HSF-1(-)17-aagG)조、HSF-1(-)17-aag(+)조、HSF-1(+) 17-aag(-)조、HSF-1(+)17-aag(+)조.주:HSF-1(-)대표전염료함목적간우편단질립,HSF-1(+)대표전염료공재질립,17-aag(-)대표미수17-aag간예,17-aag(+)대표수17-aag간예.매조세포경상응처리후,통과FCM측정각조재처리후적세포조망비례,비교각처리인소대결장암세포주SW1116적살상작용.통과Western인적검측각조중H5P90、HSP70、HSP27적표체량,평개세포조망비례적고저여열휴극단백적표체량시부유관.결과:17-aag대야생형SW1116세포증식구유명현적억제작용,가유도G2/M기주기조체화세포조망.전염조세포후,HSF-1(-)17-aag(-)조여HSF-1(+)17-aag(-)조간세포조망비례차이무통계학의의;HSF-1(-)17-aag(+)조교HSF-1(+)17-aag(+)조세포조망비례고,이세포내HSP90、HSP70、HSP27표체량균교HSF-1(+)17-aag(+)조강저.결론:17-aag가유도체외결장암SW1116세포발생조망화주기조체.재간우HSF-1표체후,17-aag유도세포조망적작용명현증강.