动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2011年
4期
1-5
,共5页
吴刘成%刘春%蒋荧梅%王生存%邵义祥
吳劉成%劉春%蔣熒梅%王生存%邵義祥
오류성%류춘%장형매%왕생존%소의상
B6-Co突变系小鼠%Map3k1基因%PCR扩增%序列分析
B6-Co突變繫小鼠%Map3k1基因%PCR擴增%序列分析
B6-Co돌변계소서%Map3k1기인%PCR확증%서렬분석
对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3kl基因的突变位点.以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T栽体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,Eco R I酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序.成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6一C0小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究.
對具有角膜混濁錶型的B6-Co突變繫小鼠突變候選基因Map3k1進行剋隆及測序分析,尋找該突變繫小鼠Map3kl基因的突變位點.以小鼠Map3k1基因的mRNA、全長及上遊5 kb序列設計引物,分彆以基因組DNA和mRNA為模闆,採用PCR和RT-PCR技術分段擴增目的基因,將目的片段連接在T栽體上,轉化至感受態細胞,篩選暘性剋隆,質粒DNA分子提取,電泳檢測,Eco R I酶切釋放目的片段,送上海生工生物工程技術服務有限公司測序.成功擴增齣Map3k1基因的20箇外顯子和上遊調控序列,B6一C0小鼠測序結果與基因組數據庫序列比對,該基因位于13號染色體第112 559 574的堿基由T突變為A,編碼的蛋白質第314氨基痠由亮氨痠變為穀氨痠,但是該基因的錶達調控及蛋白質剪切機製仍有待深入研究.
대구유각막혼탁표형적B6-Co돌변계소서돌변후선기인Map3k1진행극륭급측서분석,심조해돌변계소서Map3kl기인적돌변위점.이소서Map3k1기인적mRNA、전장급상유5 kb서렬설계인물,분별이기인조DNA화mRNA위모판,채용PCR화RT-PCR기술분단확증목적기인,장목적편단련접재T재체상,전화지감수태세포,사선양성극륭,질립DNA분자제취,전영검측,Eco R I매절석방목적편단,송상해생공생물공정기술복무유한공사측서.성공확증출Map3k1기인적20개외현자화상유조공서렬,B6일C0소서측서결과여기인조수거고서렬비대,해기인위우13호염색체제112 559 574적감기유T돌변위A,편마적단백질제314안기산유량안산변위곡안산,단시해기인적표체조공급단백질전절궤제잉유대심입연구.
