农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
669-676
,共8页
张俊莲%王丽%秦舒浩%司怀军%刘玉汇%王蒂
張俊蓮%王麗%秦舒浩%司懷軍%劉玉彙%王蒂
장준련%왕려%진서호%사부군%류옥회%왕체
烟草%拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX1)%rd29A启动子%分子检测%耐盐性
煙草%擬南芥液泡膜Na+/H+逆嚮轉運蛋白基因(AtNHX1)%rd29A啟動子%分子檢測%耐鹽性
연초%의남개액포막Na+/H+역향전운단백기인(AtNHX1)%rd29A계동자%분자검측%내염성
拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHXl)在植物耐盐机制中有重要作用.为了鉴定AtNHX1基因功能和创制耐盐烟草新种质,本研究用农杆菌介导法将rd29A启动子驱动的AtNHX1基因导入烟草(Nicotiana tabacum L.),获得72株卡那霉素抗性再生植株,17株在MS+85.5 mmol/L NaC1培养基上生长良好.对其进行PCR、Southern杂交和Northern杂交检测,证实AtNHX1基因已整合到烟草基因组中,并进行正常转录,且其转录受盐逆境的诱导.在含盐(85.5、171、256和342 mmol/L NaCl)培养基上进行对照植株和转基因植株生长及叶片丙二醛含量的分析,结果显示,转基因株系的生长势和根发生能力明显优于对照,且叶片丙二醛含量显著低于对照,表明rd29A启动子驱动AtNHX1基因的导入和表达可显著提高转基因烟草植株的耐盐性.结果提示rd29A启动子驱动的AtNHX1基因表达单元可在异源植物中正常转录和表达,可用于植物耐盐基因工程育种.
擬南芥液泡膜Na+/H+逆嚮轉運蛋白基因(AtNHXl)在植物耐鹽機製中有重要作用.為瞭鑒定AtNHX1基因功能和創製耐鹽煙草新種質,本研究用農桿菌介導法將rd29A啟動子驅動的AtNHX1基因導入煙草(Nicotiana tabacum L.),穫得72株卡那黴素抗性再生植株,17株在MS+85.5 mmol/L NaC1培養基上生長良好.對其進行PCR、Southern雜交和Northern雜交檢測,證實AtNHX1基因已整閤到煙草基因組中,併進行正常轉錄,且其轉錄受鹽逆境的誘導.在含鹽(85.5、171、256和342 mmol/L NaCl)培養基上進行對照植株和轉基因植株生長及葉片丙二醛含量的分析,結果顯示,轉基因株繫的生長勢和根髮生能力明顯優于對照,且葉片丙二醛含量顯著低于對照,錶明rd29A啟動子驅動AtNHX1基因的導入和錶達可顯著提高轉基因煙草植株的耐鹽性.結果提示rd29A啟動子驅動的AtNHX1基因錶達單元可在異源植物中正常轉錄和錶達,可用于植物耐鹽基因工程育種.
의남개액포막Na+/H+역향전운단백기인(AtNHXl)재식물내염궤제중유중요작용.위료감정AtNHX1기인공능화창제내염연초신충질,본연구용농간균개도법장rd29A계동자구동적AtNHX1기인도입연초(Nicotiana tabacum L.),획득72주잡나매소항성재생식주,17주재MS+85.5 mmol/L NaC1배양기상생장량호.대기진행PCR、Southern잡교화Northern잡교검측,증실AtNHX1기인이정합도연초기인조중,병진행정상전록,차기전록수염역경적유도.재함염(85.5、171、256화342 mmol/L NaCl)배양기상진행대조식주화전기인식주생장급협편병이철함량적분석,결과현시,전기인주계적생장세화근발생능력명현우우대조,차협편병이철함량현저저우대조,표명rd29A계동자구동AtNHX1기인적도입화표체가현저제고전기인연초식주적내염성.결과제시rd29A계동자구동적AtNHX1기인표체단원가재이원식물중정상전록화표체,가용우식물내염기인공정육충.
