湖南大学学报（自然科学版）
湖南大學學報（自然科學版）
호남대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HUNAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES EDITION)
2012年
7期
65-69
,共5页
段朝军%何丹%段红艳%刘斌%刘浩
段朝軍%何丹%段紅豔%劉斌%劉浩
단조군%하단%단홍염%류빈%류호
一氧化氮%新鲜冰冻血浆%一氧化氮合成酶%内皮细胞
一氧化氮%新鮮冰凍血漿%一氧化氮閤成酶%內皮細胞
일양화담%신선빙동혈장%일양화담합성매%내피세포
探讨新鲜冰冻血浆(FFP)对人肺正常微血管内皮细胞(HPMECs)一氧化氮(NO)释放的影响及其机制.采用NO/Nitrite/Nitrate分析法检测了体外培养内皮细胞HPMECs经FFP处理后不同时间点细胞上清NO含量.结果显示:与培养基空白对照组相比,FFP显著增加内皮细胞NO生成；采用磷酸化蛋白激酶抗体芯片和免疫印迹方法筛选和鉴定FFP处理后内皮细胞相关蛋白激酶磷酸化,结果为FFP显著增加内皮细胞AMPKα1,Akt1和eNOS蛋白的磷酸化.进一步分别采用Compound C(AMPK抑制剂),LY294002(PI3K/Akt抑制剂)或L-NAME(NOS抑制剂)预处理细胞,阻挡AMPKα1/Akt1/eNOS信号转导通路.结果显示上述三种抑制剂均能抑制 FFP诱导eNOS激活和NO生成,表明AMPKα1/AKt1 /eNOS信号转导通路介导FFP诱导NO分泌参与血管保护.
探討新鮮冰凍血漿(FFP)對人肺正常微血管內皮細胞(HPMECs)一氧化氮(NO)釋放的影響及其機製.採用NO/Nitrite/Nitrate分析法檢測瞭體外培養內皮細胞HPMECs經FFP處理後不同時間點細胞上清NO含量.結果顯示:與培養基空白對照組相比,FFP顯著增加內皮細胞NO生成；採用燐痠化蛋白激酶抗體芯片和免疫印跡方法篩選和鑒定FFP處理後內皮細胞相關蛋白激酶燐痠化,結果為FFP顯著增加內皮細胞AMPKα1,Akt1和eNOS蛋白的燐痠化.進一步分彆採用Compound C(AMPK抑製劑),LY294002(PI3K/Akt抑製劑)或L-NAME(NOS抑製劑)預處理細胞,阻擋AMPKα1/Akt1/eNOS信號轉導通路.結果顯示上述三種抑製劑均能抑製 FFP誘導eNOS激活和NO生成,錶明AMPKα1/AKt1 /eNOS信號轉導通路介導FFP誘導NO分泌參與血管保護.
탐토신선빙동혈장(FFP)대인폐정상미혈관내피세포(HPMECs)일양화담(NO)석방적영향급기궤제.채용NO/Nitrite/Nitrate분석법검측료체외배양내피세포HPMECs경FFP처리후불동시간점세포상청NO함량.결과현시:여배양기공백대조조상비,FFP현저증가내피세포NO생성；채용린산화단백격매항체심편화면역인적방법사선화감정FFP처리후내피세포상관단백격매린산화,결과위FFP현저증가내피세포AMPKα1,Akt1화eNOS단백적린산화.진일보분별채용Compound C(AMPK억제제),LY294002(PI3K/Akt억제제)혹L-NAME(NOS억제제)예처리세포,조당AMPKα1/Akt1/eNOS신호전도통로.결과현시상술삼충억제제균능억제 FFP유도eNOS격활화NO생성,표명AMPKα1/AKt1 /eNOS신호전도통로개도FFP유도NO분비삼여혈관보호.
