四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2011年
6期
1397-1402
,共6页
喻川%苟春宝%黄静%王勇%陈放%魏炜
喻川%茍春寶%黃靜%王勇%陳放%魏煒
유천%구춘보%황정%왕용%진방%위위
麻疯树%肌醇-1-磷酸合成酶%克隆%原核表达
痳瘋樹%肌醇-1-燐痠閤成酶%剋隆%原覈錶達
마풍수%기순-1-린산합성매%극륭%원핵표체
通过RACE技术,克隆了麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因(JcMIPS),其开放读码框为1530 bp,编码510个氨基酸.序列分析表明,JcMIPS与多种植物MIPS基因的氨基酸序列具有较高相似性,达87.08％～91.180％,且含有MIPS基因的四个保守域.在此基础上构建了原核表达载体,在1 mmol/L IPTG,18℃下诱导表达5h,获得了可溶性的目的蛋白.亲和层析纯化目的蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JcMIPS原核表达成功.
通過RACE技術,剋隆瞭痳瘋樹肌醇-1-燐痠閤成酶基因(JcMIPS),其開放讀碼框為1530 bp,編碼510箇氨基痠.序列分析錶明,JcMIPS與多種植物MIPS基因的氨基痠序列具有較高相似性,達87.08％～91.180％,且含有MIPS基因的四箇保守域.在此基礎上構建瞭原覈錶達載體,在1 mmol/L IPTG,18℃下誘導錶達5h,穫得瞭可溶性的目的蛋白.親和層析純化目的蛋白,通過體外酶學反應鑒定,純化樣品具有酶學活性,錶明JcMIPS原覈錶達成功.
통과RACE기술,극륭료마풍수기순-1-린산합성매기인(JcMIPS),기개방독마광위1530 bp,편마510개안기산.서렬분석표명,JcMIPS여다충식물MIPS기인적안기산서렬구유교고상사성,체87.08％～91.180％,차함유MIPS기인적사개보수역.재차기출상구건료원핵표체재체,재1 mmol/L IPTG,18℃하유도표체5h,획득료가용성적목적단백.친화층석순화목적단백,통과체외매학반응감정,순화양품구유매학활성,표명JcMIPS원핵표체성공.
