中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
23期
6-11
,共6页
猪%ATF4%栽体构建%瞬时转染
豬%ATF4%栽體構建%瞬時轉染
저%ATF4%재체구건%순시전염
克隆猪ATF4基因CDS,构建pcDNA3.1(+ )-ATF4真核超表达载体,为下一步在细胞水平和个体水平研究该基因功能奠定基础.提取RNA,运用RT-PCR和巢式PCR技术扩增猪ATF4全部编码序列,克隆转化到pMD 18-T载体中,测序验证后,酶切连接到pcDNA3.1(+)载体中,构建成pcDNA3.1 (+)-ATF4真核超表达栽体,对其进行酶切和测序鉴定并在细胞水平上进行表达量的鉴定.实验结果表明,在转染了pcDNA3.1 (+)-ATF4载体的细胞中,ATF4 mRNA表达水平明显增加,成功构建了pcDNA3.1(+ )-ATF4真核超表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.
剋隆豬ATF4基因CDS,構建pcDNA3.1(+ )-ATF4真覈超錶達載體,為下一步在細胞水平和箇體水平研究該基因功能奠定基礎.提取RNA,運用RT-PCR和巢式PCR技術擴增豬ATF4全部編碼序列,剋隆轉化到pMD 18-T載體中,測序驗證後,酶切連接到pcDNA3.1(+)載體中,構建成pcDNA3.1 (+)-ATF4真覈超錶達栽體,對其進行酶切和測序鑒定併在細胞水平上進行錶達量的鑒定.實驗結果錶明,在轉染瞭pcDNA3.1 (+)-ATF4載體的細胞中,ATF4 mRNA錶達水平明顯增加,成功構建瞭pcDNA3.1(+ )-ATF4真覈超錶達載體,為進一步研究該基因的功能奠定瞭基礎.
극륭저ATF4기인CDS,구건pcDNA3.1(+ )-ATF4진핵초표체재체,위하일보재세포수평화개체수평연구해기인공능전정기출.제취RNA,운용RT-PCR화소식PCR기술확증저ATF4전부편마서렬,극륭전화도pMD 18-T재체중,측서험증후,매절련접도pcDNA3.1(+)재체중,구건성pcDNA3.1 (+)-ATF4진핵초표체재체,대기진행매절화측서감정병재세포수평상진행표체량적감정.실험결과표명,재전염료pcDNA3.1 (+)-ATF4재체적세포중,ATF4 mRNA표체수평명현증가,성공구건료pcDNA3.1(+ )-ATF4진핵초표체재체,위진일보연구해기인적공능전정료기출.
