中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2002年
6期
332-334
,共3页
张中庸%曾宪芳%李靓如%易新元%曾庆仁%张京%言敢威%章洁
張中庸%曾憲芳%李靚如%易新元%曾慶仁%張京%言敢威%章潔
장중용%증헌방%리정여%역신원%증경인%장경%언감위%장길
日本血吸虫%血吸虫尾蚴%细胞传代培养
日本血吸蟲%血吸蟲尾蚴%細胞傳代培養
일본혈흡충%혈흡충미유%세포전대배양
目的探索体外培养日本血吸虫尾蚴细胞的增殖与传代技术.方法无菌收集日本血吸虫活尾蚴5 000～10 000条,置于含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中,用组织刀快速割切尾蚴使成组织碎裂物,加入250U蟹胶原酶在26℃下孵育30min,然后离心去酶,加入含有青霉素(100U/ml)、链霉素(0.1 mg/ml),两性霉素R(0.25μg/ml)和适量促细胞生长物的RPMI 1640改良培养基中作原代培养,当贴壁细胞增殖长满瓶底时,以1:2的接种率进行传代培养;获取第5代培养细胞作ELISA检测血吸虫病患者血清中抗体.结果在原代培养的第3天可见尾蚴组织的周围有呈单个存在或索状排列的发亮细胞,第10天可见单层细胞形成,第14天贴壁细胞长满瓶底并作传代培养;在传代培养中可见细胞呈均匀生长,每7～14 d传代一次;用第5代培养细胞作抗原,检测31例患者的阳性率为90.3%,检测30名正常人血清的假阳性率为6.7%.结论日本血吸虫尾蚴细胞体外传代培养至第5代,可用于免疫学研究.
目的探索體外培養日本血吸蟲尾蚴細胞的增殖與傳代技術.方法無菌收集日本血吸蟲活尾蚴5 000～10 000條,置于含有10%胎牛血清的RPMI 1640培養基中,用組織刀快速割切尾蚴使成組織碎裂物,加入250U蟹膠原酶在26℃下孵育30min,然後離心去酶,加入含有青黴素(100U/ml)、鏈黴素(0.1 mg/ml),兩性黴素R(0.25μg/ml)和適量促細胞生長物的RPMI 1640改良培養基中作原代培養,噹貼壁細胞增殖長滿瓶底時,以1:2的接種率進行傳代培養;穫取第5代培養細胞作ELISA檢測血吸蟲病患者血清中抗體.結果在原代培養的第3天可見尾蚴組織的週圍有呈單箇存在或索狀排列的髮亮細胞,第10天可見單層細胞形成,第14天貼壁細胞長滿瓶底併作傳代培養;在傳代培養中可見細胞呈均勻生長,每7～14 d傳代一次;用第5代培養細胞作抗原,檢測31例患者的暘性率為90.3%,檢測30名正常人血清的假暘性率為6.7%.結論日本血吸蟲尾蚴細胞體外傳代培養至第5代,可用于免疫學研究.
목적탐색체외배양일본혈흡충미유세포적증식여전대기술.방법무균수집일본혈흡충활미유5 000～10 000조,치우함유10%태우혈청적RPMI 1640배양기중,용조직도쾌속할절미유사성조직쇄렬물,가입250U해효원매재26℃하부육30min,연후리심거매,가입함유청매소(100U/ml)、련매소(0.1 mg/ml),량성매소R(0.25μg/ml)화괄량촉세포생장물적RPMI 1640개량배양기중작원대배양,당첩벽세포증식장만병저시,이1:2적접충솔진행전대배양;획취제5대배양세포작ELISA검측혈흡충병환자혈청중항체.결과재원대배양적제3천가견미유조직적주위유정단개존재혹색상배렬적발량세포,제10천가견단층세포형성,제14천첩벽세포장만병저병작전대배양;재전대배양중가견세포정균균생장,매7～14 d전대일차;용제5대배양세포작항원,검측31례환자적양성솔위90.3%,검측30명정상인혈청적가양성솔위6.7%.결론일본혈흡충미유세포체외전대배양지제5대,가용우면역학연구.
