细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
6期
644-646
,共3页
白丽园%于芳%傅海燕%杨国栋%张杰%晋亮%卢兹凡
白麗園%于芳%傅海燕%楊國棟%張傑%晉亮%盧玆凡
백려완%우방%부해연%양국동%장걸%진량%로자범
Qki-5%腺病毒%乳腺癌
Qki-5%腺病毒%乳腺癌
Qki-5%선병독%유선암
目的:构建针对Qki-5人重组腺病毒表达载体,并在能在转染该病毒的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中观察到该基因过表达效果.方法:重组腺病毒穿梭载体pShuttle-Qki-5-IRES-EGFP与骨架载体共转化到大肠杆菌BJ5183中,同源重组得到重组腺病毒载体,后者转染HEK293细胞,包装并扩增出病毒颗粒.用获得的病毒感染Qki-5表达较低的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,收集细胞总RNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western blot方法检测细胞中基因表达的变化.结果:经限制性内切酶酶切鉴定,证实针对Qki-5基因的重组腺病毒载体构建成功.RT-PCR和Western blot方法证实,在MDA-MB-231细胞中,Qki-5基因在mRNA和蛋白水平均有上升.结论:Qki-5腺病毒载体够建成功并且可以在乳腺癌细胞MDA-MB-231内表达.
目的:構建針對Qki-5人重組腺病毒錶達載體,併在能在轉染該病毒的人乳腺癌細胞株MDA-MB-231中觀察到該基因過錶達效果.方法:重組腺病毒穿梭載體pShuttle-Qki-5-IRES-EGFP與骨架載體共轉化到大腸桿菌BJ5183中,同源重組得到重組腺病毒載體,後者轉染HEK293細胞,包裝併擴增齣病毒顆粒.用穫得的病毒感染Qki-5錶達較低的人乳腺癌細胞株MDA-MB-231,收集細胞總RNA和總蛋白,採用RT-PCR和Western blot方法檢測細胞中基因錶達的變化.結果:經限製性內切酶酶切鑒定,證實針對Qki-5基因的重組腺病毒載體構建成功.RT-PCR和Western blot方法證實,在MDA-MB-231細胞中,Qki-5基因在mRNA和蛋白水平均有上升.結論:Qki-5腺病毒載體夠建成功併且可以在乳腺癌細胞MDA-MB-231內錶達.
목적:구건침대Qki-5인중조선병독표체재체,병재능재전염해병독적인유선암세포주MDA-MB-231중관찰도해기인과표체효과.방법:중조선병독천사재체pShuttle-Qki-5-IRES-EGFP여골가재체공전화도대장간균BJ5183중,동원중조득도중조선병독재체,후자전염HEK293세포,포장병확증출병독과립.용획득적병독감염Qki-5표체교저적인유선암세포주MDA-MB-231,수집세포총RNA화총단백,채용RT-PCR화Western blot방법검측세포중기인표체적변화.결과:경한제성내절매매절감정,증실침대Qki-5기인적중조선병독재체구건성공.RT-PCR화Western blot방법증실,재MDA-MB-231세포중,Qki-5기인재mRNA화단백수평균유상승.결론:Qki-5선병독재체구건성공병차가이재유선암세포MDA-MB-231내표체.
