海南医学院学报
海南醫學院學報
해남의학원학보
2009年
4期
303-305
,共3页
吴娅娜%张克君%崔海宁%王正文%明松林
吳婭娜%張剋君%崔海寧%王正文%明鬆林
오아나%장극군%최해저%왕정문%명송림
胰腺移植%缺血再灌注损伤%凋亡%PUMA蛋白%大鼠
胰腺移植%缺血再灌註損傷%凋亡%PUMA蛋白%大鼠
이선이식%결혈재관주손상%조망%PUMA단백%대서
目的:探讨PUMA在移植胰腺缺血再灌注损伤(I/RI)中的早期促凋亡作用.方法:对封闭群大鼠建立大鼠腔静脉内分泌引流、肠道外分泌引流的动物模型.再灌注后第0、1、2、3、4、6、9、12 h等时点,每时点处死5只大鼠,切取移植胰腺,石蜡包埋切片,原位DNA缺口末端标记(TUNEL)法测定胰腺组织细胞凋亡, Western blot方法测定移植胰腺组织PUMA,bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达.结果:再灌注术后第0、1、2、3、4、6、9、12 h,胰腺细胞凋亡数分别为(29.42±4.93)、(47.65±6.43)、(74.80±9.73)、(106.35±16.80)、(148.71±19.50)、(123.96±15.54)、(97.32±10.60)和(57.42±9.56)个/高倍视野.各时点均显著高于正常胰腺(23.48±4.26).第4小时细胞凋亡数明显增高,12 h降低到最低值,不同组细胞凋亡数的差异有统计学意义(P <0.01);PUMA以及其下游的bax和caspase-8蛋白表达在第4小时达到最高峰,12 h降低到最高值,bcl-2在第4小时达到最低值,蛋白表达差异均有统计学意义(P <0.05),以后逐渐升高,12 h降低到最低值,PUMA表达与各时点的细胞凋亡数有明显的正相关(r=1.00,P <0.05).结论:I/RI后细胞早期凋亡与PUMA活化有关,PUMA是通过调节下游bax、caspase-8、bcl-2基因发挥凋亡促进作用.
目的:探討PUMA在移植胰腺缺血再灌註損傷(I/RI)中的早期促凋亡作用.方法:對封閉群大鼠建立大鼠腔靜脈內分泌引流、腸道外分泌引流的動物模型.再灌註後第0、1、2、3、4、6、9、12 h等時點,每時點處死5隻大鼠,切取移植胰腺,石蠟包埋切片,原位DNA缺口末耑標記(TUNEL)法測定胰腺組織細胞凋亡, Western blot方法測定移植胰腺組織PUMA,bcl-2、bax、caspase-3蛋白錶達.結果:再灌註術後第0、1、2、3、4、6、9、12 h,胰腺細胞凋亡數分彆為(29.42±4.93)、(47.65±6.43)、(74.80±9.73)、(106.35±16.80)、(148.71±19.50)、(123.96±15.54)、(97.32±10.60)和(57.42±9.56)箇/高倍視野.各時點均顯著高于正常胰腺(23.48±4.26).第4小時細胞凋亡數明顯增高,12 h降低到最低值,不同組細胞凋亡數的差異有統計學意義(P <0.01);PUMA以及其下遊的bax和caspase-8蛋白錶達在第4小時達到最高峰,12 h降低到最高值,bcl-2在第4小時達到最低值,蛋白錶達差異均有統計學意義(P <0.05),以後逐漸升高,12 h降低到最低值,PUMA錶達與各時點的細胞凋亡數有明顯的正相關(r=1.00,P <0.05).結論:I/RI後細胞早期凋亡與PUMA活化有關,PUMA是通過調節下遊bax、caspase-8、bcl-2基因髮揮凋亡促進作用.
목적:탐토PUMA재이식이선결혈재관주손상(I/RI)중적조기촉조망작용.방법:대봉폐군대서건립대서강정맥내분비인류、장도외분비인류적동물모형.재관주후제0、1、2、3、4、6、9、12 h등시점,매시점처사5지대서,절취이식이선,석사포매절편,원위DNA결구말단표기(TUNEL)법측정이선조직세포조망, Western blot방법측정이식이선조직PUMA,bcl-2、bax、caspase-3단백표체.결과:재관주술후제0、1、2、3、4、6、9、12 h,이선세포조망수분별위(29.42±4.93)、(47.65±6.43)、(74.80±9.73)、(106.35±16.80)、(148.71±19.50)、(123.96±15.54)、(97.32±10.60)화(57.42±9.56)개/고배시야.각시점균현저고우정상이선(23.48±4.26).제4소시세포조망수명현증고,12 h강저도최저치,불동조세포조망수적차이유통계학의의(P <0.01);PUMA이급기하유적bax화caspase-8단백표체재제4소시체도최고봉,12 h강저도최고치,bcl-2재제4소시체도최저치,단백표체차이균유통계학의의(P <0.05),이후축점승고,12 h강저도최저치,PUMA표체여각시점적세포조망수유명현적정상관(r=1.00,P <0.05).결론:I/RI후세포조기조망여PUMA활화유관,PUMA시통과조절하유bax、caspase-8、bcl-2기인발휘조망촉진작용.