医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2010年
6期
488-492
,共5页
赵中松%赵敬湘%张韶峰%王字玲%唐红卫%李锦毅
趙中鬆%趙敬湘%張韶峰%王字玲%唐紅衛%李錦毅
조중송%조경상%장소봉%왕자령%당홍위%리금의
PEX基因%信号肽%慢病毒载体%293FT细胞
PEX基因%信號肽%慢病毒載體%293FT細胞
PEX기인%신호태%만병독재체%293FT세포
目的 构建含人MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒,并在293FT细胞中分泌表达PEX蛋白.方法 利用RT-PCR、基因重组等技术,构建含MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒表达载体pBPLV-signal-PEX,在脂质体介导下与包装质粒(pLP1、pLP2)、包膜质粒(pLP/VSVG)共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并进行滴度测定.慢病毒感染2931;3"细胞后,Western印迹法检测293FI"细胞培养上清中PEX的表达.结果 酶切和DNA测序表明慢病毒表达载pBPLV-signal-PEX构建正确,四质粒共转染293FT细胞成功获得慢病毒;慢病毒感染293FT细胞后,在细胞培养卜清中可检测到PEX蛋白的表达.结论 成功构建了含人PEX的重组慢病毒,在体外有效感染293fT细胞并持续分泌表达目的 蛋白,为进一步研究PEX在肿瘤侵袭与转移中的作用提供实验基础.
目的 構建含人MMP-9信號肽-MMP-2-PEX片段的重組慢病毒,併在293FT細胞中分泌錶達PEX蛋白.方法 利用RT-PCR、基因重組等技術,構建含MMP-9信號肽-MMP-2-PEX片段的重組慢病毒錶達載體pBPLV-signal-PEX,在脂質體介導下與包裝質粒(pLP1、pLP2)、包膜質粒(pLP/VSVG)共轉染293FT細胞,包裝產生慢病毒併進行滴度測定.慢病毒感染2931;3"細胞後,Western印跡法檢測293FI"細胞培養上清中PEX的錶達.結果 酶切和DNA測序錶明慢病毒錶達載pBPLV-signal-PEX構建正確,四質粒共轉染293FT細胞成功穫得慢病毒;慢病毒感染293FT細胞後,在細胞培養蔔清中可檢測到PEX蛋白的錶達.結論 成功構建瞭含人PEX的重組慢病毒,在體外有效感染293fT細胞併持續分泌錶達目的 蛋白,為進一步研究PEX在腫瘤侵襲與轉移中的作用提供實驗基礎.
목적 구건함인MMP-9신호태-MMP-2-PEX편단적중조만병독,병재293FT세포중분비표체PEX단백.방법 이용RT-PCR、기인중조등기술,구건함MMP-9신호태-MMP-2-PEX편단적중조만병독표체재체pBPLV-signal-PEX,재지질체개도하여포장질립(pLP1、pLP2)、포막질립(pLP/VSVG)공전염293FT세포,포장산생만병독병진행적도측정.만병독감염2931;3"세포후,Western인적법검측293FI"세포배양상청중PEX적표체.결과 매절화DNA측서표명만병독표체재pBPLV-signal-PEX구건정학,사질립공전염293FT세포성공획득만병독;만병독감염293FT세포후,재세포배양복청중가검측도PEX단백적표체.결론 성공구건료함인PEX적중조만병독,재체외유효감염293fT세포병지속분비표체목적 단백,위진일보연구PEX재종류침습여전이중적작용제공실험기출.
