生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2011年
2期
43-46
,共4页
王强%彭开松%严兵%涂健%屠利民%祁克宗
王彊%彭開鬆%嚴兵%塗健%屠利民%祁剋宗
왕강%팽개송%엄병%도건%도이민%기극종
β-防御素%Gal-2%pPIC9k%毕赤酵母
β-防禦素%Gal-2%pPIC9k%畢赤酵母
β-방어소%Gal-2%pPIC9k%필적효모
利用RT-PCR技术,从鸡肺脏总RNA中克隆了Gal-2 eDNA全序列,以克隆载体为模板PCR扩增Gal-2成熟肽eDNA,将成熟肽eDNA插入到分泌型表达载体pPIC9k中,构建pPIC9k-Gal-2成熟肽表达载体;通过电转化方法将表达质粒导八到毕赤酵母GSl15体内,阳性克隆菌经甲醇诱导表达,SDS-PAGE蛋白电泳检测在3.9ku附近出现预期大小的条带,灰度扫描显示蛋白表达量占总分泌蛋白量的63.7%.抑菌试验结果表明,表达的防御素对大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有-定的抑菌活性.
利用RT-PCR技術,從鷄肺髒總RNA中剋隆瞭Gal-2 eDNA全序列,以剋隆載體為模闆PCR擴增Gal-2成熟肽eDNA,將成熟肽eDNA插入到分泌型錶達載體pPIC9k中,構建pPIC9k-Gal-2成熟肽錶達載體;通過電轉化方法將錶達質粒導八到畢赤酵母GSl15體內,暘性剋隆菌經甲醇誘導錶達,SDS-PAGE蛋白電泳檢測在3.9ku附近齣現預期大小的條帶,灰度掃描顯示蛋白錶達量佔總分泌蛋白量的63.7%.抑菌試驗結果錶明,錶達的防禦素對大腸埃希氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄毬菌有-定的抑菌活性.
이용RT-PCR기술,종계폐장총RNA중극륭료Gal-2 eDNA전서렬,이극륭재체위모판PCR확증Gal-2성숙태eDNA,장성숙태eDNA삽입도분비형표체재체pPIC9k중,구건pPIC9k-Gal-2성숙태표체재체;통과전전화방법장표체질립도팔도필적효모GSl15체내,양성극륭균경갑순유도표체,SDS-PAGE단백전영검측재3.9ku부근출현예기대소적조대,회도소묘현시단백표체량점총분비단백량적63.7%.억균시험결과표명,표체적방어소대대장애희씨균、을형부상한사문씨균、고초아포간균화금황색포도구균유-정적억균활성.
