CAJ | 학술논문

本试验对SCoT应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异;结果表明,甜橙SCoT标记的20μL优化反应体系为:DNA模板80 ng,Mg2+浓度1.6 mmol/L,dNTPs浓度0.3 mmol/L,引物浓度0.2μml/L,Taq DNA聚合酶用量1.6 U,扩增产物在100～2000 bp之间,扩增条带明亮清晰,反应体系具有良好的稳定性和可重复性.24份试材的测序片段的大小为1090-1091 bp,一致性达到99.84%,存在单碱基的缺失与替换,BLAST结果显示.该序列的编码蛋白质与核糖体蛋白S3的N端同源性高;利用单碱基变异可以区分其中的12个甜橙变异株系和'安江香柚',其他变异株系还需要结合其他的分子标记技术来进行鉴别,有待进一步研究.
본시험대SCoT응체계진행우화,병사선합괄적인물,연후대24빈시재진행SCoT표기,획득적목적편단극륭측서,통과측서결과탐토기유전변이;결과표명,첨등SCoT표기적20μL우화반응체계위:DNA모판80 ng,Mg2+농도1.6 mmol/L,dNTPs농도0.3 mmol/L,인물농도0.2μml/L,Taq DNA취합매용량1.6 U,확증산물재100～2000 bp지간,확증조대명량청석,반응체계구유량호적은정성화가중복성.24빈시재적측서편단적대소위1090-1091 bp,일치성체도99.84%,존재단감기적결실여체환,BLAST결과현시.해서렬적편마단백질여핵당체단백S3적N단동원성고;이용단감기변이가이구분기중적12개첨등변이주계화'안강향유',기타변이주계환수요결합기타적분자표기기술래진행감별,유대진일보연구.