实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2012年
6期
824-826
,共3页
Bcl-2%肝癌%siRNA
Bcl-2%肝癌%siRNA
Bcl-2%간암%siRNA
目的 构建靶向Bcl -2基因的siRNA表达质粒,观察其对肝癌细胞Hep3B的影响及对氨甲蝶呤(MTX)化疗敏感性的影响.方法 根据siRNA设计原则,设计并合成Bcl -2的siRNA序列,克隆到pRNAT- U6.1/Neo质粒U6启动子下游构建重组质粒;经序列分析确认质粒构建成功后,将重组质粒转染入人肝癌细胞Hep3B,通过RT- PCR、Western blot分析Bcl -2的表达,细胞生长实验分析其对肝癌细胞生长的影响及对MTX化疗敏感性的影响.结果 重组质粒pRNAT- U6.1/Neo- Bcl-2经过基因序列分析,siRNA片段成功插入,转染此质粒可使Bcl -2的翻译和蛋白表达水平一定程度的降低,并且可抑制Hep3B细胞的生长,增加其对MTX化疗的敏感性.结论 成功构建并筛选出靶向Bcl-2基因的siRNA表达载体,它能抑制肝癌细胞Hep3B的生长及增加其对MTX化疗的敏感性,为基因治疗肝癌提供了新策略和实验基础.
目的 構建靶嚮Bcl -2基因的siRNA錶達質粒,觀察其對肝癌細胞Hep3B的影響及對氨甲蝶呤(MTX)化療敏感性的影響.方法 根據siRNA設計原則,設計併閤成Bcl -2的siRNA序列,剋隆到pRNAT- U6.1/Neo質粒U6啟動子下遊構建重組質粒;經序列分析確認質粒構建成功後,將重組質粒轉染入人肝癌細胞Hep3B,通過RT- PCR、Western blot分析Bcl -2的錶達,細胞生長實驗分析其對肝癌細胞生長的影響及對MTX化療敏感性的影響.結果 重組質粒pRNAT- U6.1/Neo- Bcl-2經過基因序列分析,siRNA片段成功插入,轉染此質粒可使Bcl -2的翻譯和蛋白錶達水平一定程度的降低,併且可抑製Hep3B細胞的生長,增加其對MTX化療的敏感性.結論 成功構建併篩選齣靶嚮Bcl-2基因的siRNA錶達載體,它能抑製肝癌細胞Hep3B的生長及增加其對MTX化療的敏感性,為基因治療肝癌提供瞭新策略和實驗基礎.
목적 구건파향Bcl -2기인적siRNA표체질립,관찰기대간암세포Hep3B적영향급대안갑접령(MTX)화료민감성적영향.방법 근거siRNA설계원칙,설계병합성Bcl -2적siRNA서렬,극륭도pRNAT- U6.1/Neo질립U6계동자하유구건중조질립;경서렬분석학인질립구건성공후,장중조질립전염입인간암세포Hep3B,통과RT- PCR、Western blot분석Bcl -2적표체,세포생장실험분석기대간암세포생장적영향급대MTX화료민감성적영향.결과 중조질립pRNAT- U6.1/Neo- Bcl-2경과기인서렬분석,siRNA편단성공삽입,전염차질립가사Bcl -2적번역화단백표체수평일정정도적강저,병차가억제Hep3B세포적생장,증가기대MTX화료적민감성.결론 성공구건병사선출파향Bcl-2기인적siRNA표체재체,타능억제간암세포Hep3B적생장급증가기대MTX화료적민감성,위기인치료간암제공료신책략화실험기출.
