细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
3期
280-283
,共4页
董轲%陈苏民%纪宗玲%郑玉%陈南春
董軻%陳囌民%紀宗玲%鄭玉%陳南春
동가%진소민%기종령%정옥%진남춘
小鼠era基因%基因表达%选择剪接形式
小鼠era基因%基因錶達%選擇剪接形式
소서era기인%기인표체%선택전접형식
目的:对不同剪接形式的小鼠era基因(mera)进行克隆、原核表达,并进行纯化,检测抗人Era蛋白抗体对于两种剪接形式鼠Era蛋白的特异性,为以后鼠Era蛋白的研究奠定基础.方法:采用两种剪接形式era基因的MBP融合表达载体(pMAL-meraW,pMAL-meraS),在大肠杆菌中进行表达,对其进行纯化,并应用Western blot鉴定了抗人Era蛋白抗体的特异性.结果:原核表达的MBP-mEraW、MBP-mEraS融合蛋白经过薄层扫描后发现其分别占菌体总蛋白的17%、19%;纯化后的融合蛋白纯度为67%和61%;用抗人Era蛋白抗体进行Western blot发现抗体特异性较好,适合两种剪接形式的鼠Era蛋白的检测.结论:利用原核系统高效表达了不同剪切形式的鼠era基因,并检测了兔抗人Era蛋白抗体对不同剪接形式鼠Era蛋白的特异性,为以后对鼠era基因的研究奠定了基础.
目的:對不同剪接形式的小鼠era基因(mera)進行剋隆、原覈錶達,併進行純化,檢測抗人Era蛋白抗體對于兩種剪接形式鼠Era蛋白的特異性,為以後鼠Era蛋白的研究奠定基礎.方法:採用兩種剪接形式era基因的MBP融閤錶達載體(pMAL-meraW,pMAL-meraS),在大腸桿菌中進行錶達,對其進行純化,併應用Western blot鑒定瞭抗人Era蛋白抗體的特異性.結果:原覈錶達的MBP-mEraW、MBP-mEraS融閤蛋白經過薄層掃描後髮現其分彆佔菌體總蛋白的17%、19%;純化後的融閤蛋白純度為67%和61%;用抗人Era蛋白抗體進行Western blot髮現抗體特異性較好,適閤兩種剪接形式的鼠Era蛋白的檢測.結論:利用原覈繫統高效錶達瞭不同剪切形式的鼠era基因,併檢測瞭兔抗人Era蛋白抗體對不同剪接形式鼠Era蛋白的特異性,為以後對鼠era基因的研究奠定瞭基礎.
목적:대불동전접형식적소서era기인(mera)진행극륭、원핵표체,병진행순화,검측항인Era단백항체대우량충전접형식서Era단백적특이성,위이후서Era단백적연구전정기출.방법:채용량충전접형식era기인적MBP융합표체재체(pMAL-meraW,pMAL-meraS),재대장간균중진행표체,대기진행순화,병응용Western blot감정료항인Era단백항체적특이성.결과:원핵표체적MBP-mEraW、MBP-mEraS융합단백경과박층소묘후발현기분별점균체총단백적17%、19%;순화후적융합단백순도위67%화61%;용항인Era단백항체진행Western blot발현항체특이성교호,괄합량충전접형식적서Era단백적검측.결론:이용원핵계통고효표체료불동전절형식적서era기인,병검측료토항인Era단백항체대불동전접형식서Era단백적특이성,위이후대서era기인적연구전정료기출.