微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
2期
329-334
,共6页
孙百莉%郭宗琪%罗冬娇%孙军德%严杰
孫百莉%郭宗琪%囉鼕嬌%孫軍德%嚴傑
손백리%곽종기%라동교%손군덕%엄걸
问号钩端螺旋体%ompL1基因%重组表达%分子定位%免疫应答
問號鉤耑螺鏇體%ompL1基因%重組錶達%分子定位%免疫應答
문호구단라선체%ompL1기인%중조표체%분자정위%면역응답
为了确定问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性OmpL1s抗原膜定位及其自然抗体应答情况和抗体类型,为OmpL1s用于研制通用性钩体基因工程疫苗及检测试剂盒抗原提供依据.采用显微镜凝集试验(MAT)检测四川地区156份钩体病人血清标本.用PCR和核苷酸序列分析,了解中国流行的钩体主要血清群ompL1基因型.采用常规基因工程技术构建ompL1/1和ompL1/2主要基因型原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组表达产物rOmpL1/1和rOmpL1/2.采用胶体金免疫电镜技术,对OmpL1s进行膜定位.建立了基于rOmpL1s的ELISAs,检测钩体病人血清中特异性抗体水平及其类型.试验结果表明,黄疸出血群钩体仍然是四川地区最主要的优势钩体血清群.中国流行的钩体主要血清群ompL1基因可有ompL1/1和ompL1/2两个基因型,两者核苷酸和氨基酸序列相似性之间有较明显的差异.OmpL1s是位于钩体外膜表面的蛋白分子.不同稀释度的156例钩体病人血清标本中,rOmpL1/1和rOmpL1/2特异性IgM阳性率分别为67.9%～79.5%和75.0%～75.6%,特异性IgG阳性率分别为71.8%～79.5%和75.0%～76.9%.上述试验结果提示,OmpL1s是位于钩体表面属特异性蛋白抗原.自然感染钩体时,rOmpL1/1和rOmpL1/2均可诱导机体体液免疫应答并产生IgM和IgG两类血清抗体,且两者之间有广泛的抗原交叉反应.rOmpL1/1和rOmpL1/2可作为研制通用性钩体基因工程疫苗和检测试剂盒的候选抗原.
為瞭確定問號鉤耑螺鏇體(簡稱鉤體)屬特異性OmpL1s抗原膜定位及其自然抗體應答情況和抗體類型,為OmpL1s用于研製通用性鉤體基因工程疫苗及檢測試劑盒抗原提供依據.採用顯微鏡凝集試驗(MAT)檢測四川地區156份鉤體病人血清標本.用PCR和覈苷痠序列分析,瞭解中國流行的鉤體主要血清群ompL1基因型.採用常規基因工程技術構建ompL1/1和ompL1/2主要基因型原覈錶達繫統,Ni-NTA親和層析法提純目的重組錶達產物rOmpL1/1和rOmpL1/2.採用膠體金免疫電鏡技術,對OmpL1s進行膜定位.建立瞭基于rOmpL1s的ELISAs,檢測鉤體病人血清中特異性抗體水平及其類型.試驗結果錶明,黃疸齣血群鉤體仍然是四川地區最主要的優勢鉤體血清群.中國流行的鉤體主要血清群ompL1基因可有ompL1/1和ompL1/2兩箇基因型,兩者覈苷痠和氨基痠序列相似性之間有較明顯的差異.OmpL1s是位于鉤體外膜錶麵的蛋白分子.不同稀釋度的156例鉤體病人血清標本中,rOmpL1/1和rOmpL1/2特異性IgM暘性率分彆為67.9%～79.5%和75.0%～75.6%,特異性IgG暘性率分彆為71.8%～79.5%和75.0%～76.9%.上述試驗結果提示,OmpL1s是位于鉤體錶麵屬特異性蛋白抗原.自然感染鉤體時,rOmpL1/1和rOmpL1/2均可誘導機體體液免疫應答併產生IgM和IgG兩類血清抗體,且兩者之間有廣汎的抗原交扠反應.rOmpL1/1和rOmpL1/2可作為研製通用性鉤體基因工程疫苗和檢測試劑盒的候選抗原.
위료학정문호구단라선체(간칭구체)속특이성OmpL1s항원막정위급기자연항체응답정황화항체류형,위OmpL1s용우연제통용성구체기인공정역묘급검측시제합항원제공의거.채용현미경응집시험(MAT)검측사천지구156빈구체병인혈청표본.용PCR화핵감산서렬분석,료해중국류행적구체주요혈청군ompL1기인형.채용상규기인공정기술구건ompL1/1화ompL1/2주요기인형원핵표체계통,Ni-NTA친화층석법제순목적중조표체산물rOmpL1/1화rOmpL1/2.채용효체금면역전경기술,대OmpL1s진행막정위.건립료기우rOmpL1s적ELISAs,검측구체병인혈청중특이성항체수평급기류형.시험결과표명,황달출혈군구체잉연시사천지구최주요적우세구체혈청군.중국류행적구체주요혈청군ompL1기인가유ompL1/1화ompL1/2량개기인형,량자핵감산화안기산서렬상사성지간유교명현적차이.OmpL1s시위우구체외막표면적단백분자.불동희석도적156례구체병인혈청표본중,rOmpL1/1화rOmpL1/2특이성IgM양성솔분별위67.9%～79.5%화75.0%～75.6%,특이성IgG양성솔분별위71.8%～79.5%화75.0%～76.9%.상술시험결과제시,OmpL1s시위우구체표면속특이성단백항원.자연감염구체시,rOmpL1/1화rOmpL1/2균가유도궤체체액면역응답병산생IgM화IgG량류혈청항체,차량자지간유엄범적항원교차반응.rOmpL1/1화rOmpL1/2가작위연제통용성구체기인공정역묘화검측시제합적후선항원.
