安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
18期
7862-7864,7888
,共4页
RNA干扰%siRNA%人脐静脉血管内皮细胞%血管内皮生长因子受体%基因治疗
RNA榦擾%siRNA%人臍靜脈血管內皮細胞%血管內皮生長因子受體%基因治療
RNA간우%siRNA%인제정맥혈관내피세포%혈관내피생장인자수체%기인치료
[目的]筛选血管内皮生长因子受体(VEGRF)基因特异性小干扰RNA(Small Interference RNA,siRNA),为肿瘤等疾病的基因治疗寻找一种新途径. [方法]以高表达 VEGFR1的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)为模型,采用RNA干扰技术,化学合成了3条针对血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)的特异性siRNA,用Lipofectamine2000 TM转染HUV EC细胞株,通过Real time RT-PCR技术检测HUVEC细胞VEG FR1基因mRNA的表达.并对效果最好的VEGFR1 siRNA-2进行siRNA的浓度梯度效果检测.[结果]结果表明,与对照组相比,所设计的3条siRNA均能不同程度地抑制VEGFR1 mRNA的表达, 其中siRNA-2号最有效,浓度为50 nmol/L时抑制率达到95％左右.在浓度梯度试验中, VEGFR1 siRNA-2转染浓度为50 pmol/L时,对VEGFR1基因的沉默效果还能达到50％左右.[结论] 所设计的siRNA能有效抑制VEGFR1基因的表达,为RNAi用于靶向VEGFR1的基因治疗提供了非常有效的siRNA序列.
[目的]篩選血管內皮生長因子受體(VEGRF)基因特異性小榦擾RNA(Small Interference RNA,siRNA),為腫瘤等疾病的基因治療尋找一種新途徑. [方法]以高錶達 VEGFR1的人臍靜脈血管內皮細胞(HUVEC)為模型,採用RNA榦擾技術,化學閤成瞭3條針對血管內皮生長因子受體1(VEGFR1)的特異性siRNA,用Lipofectamine2000 TM轉染HUV EC細胞株,通過Real time RT-PCR技術檢測HUVEC細胞VEG FR1基因mRNA的錶達.併對效果最好的VEGFR1 siRNA-2進行siRNA的濃度梯度效果檢測.[結果]結果錶明,與對照組相比,所設計的3條siRNA均能不同程度地抑製VEGFR1 mRNA的錶達, 其中siRNA-2號最有效,濃度為50 nmol/L時抑製率達到95％左右.在濃度梯度試驗中, VEGFR1 siRNA-2轉染濃度為50 pmol/L時,對VEGFR1基因的沉默效果還能達到50％左右.[結論] 所設計的siRNA能有效抑製VEGFR1基因的錶達,為RNAi用于靶嚮VEGFR1的基因治療提供瞭非常有效的siRNA序列.
[목적]사선혈관내피생장인자수체(VEGRF)기인특이성소간우RNA(Small Interference RNA,siRNA),위종류등질병적기인치료심조일충신도경. [방법]이고표체 VEGFR1적인제정맥혈관내피세포(HUVEC)위모형,채용RNA간우기술,화학합성료3조침대혈관내피생장인자수체1(VEGFR1)적특이성siRNA,용Lipofectamine2000 TM전염HUV EC세포주,통과Real time RT-PCR기술검측HUVEC세포VEG FR1기인mRNA적표체.병대효과최호적VEGFR1 siRNA-2진행siRNA적농도제도효과검측.[결과]결과표명,여대조조상비,소설계적3조siRNA균능불동정도지억제VEGFR1 mRNA적표체, 기중siRNA-2호최유효,농도위50 nmol/L시억제솔체도95％좌우.재농도제도시험중, VEGFR1 siRNA-2전염농도위50 pmol/L시,대VEGFR1기인적침묵효과환능체도50％좌우.[결론] 소설계적siRNA능유효억제VEGFR1기인적표체,위RNAi용우파향VEGFR1적기인치료제공료비상유효적siRNA서렬.
