基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
1期
1-5
,共5页
肌纤基因调节因子%siRNA%细胞周期%细胞增殖%BEL-7402细胞
肌纖基因調節因子%siRNA%細胞週期%細胞增殖%BEL-7402細胞
기섬기인조절인자%siRNA%세포주기%세포증식%BEL-7402세포
目的 研究MR1基因对肝癌细胞增殖的影响及机制.方法 化学合成MRI siRNA,用脂质体lipofectamine2000转染肝癌细胞系BEL-7402细胞,RT-PCR检测MR1 siRNA基因沉默效果.用SRB法、集落形成法和生长曲线法检测MR1 siRNA对BEL-7402细胞增殖的影响.流式细胞术检测BEL-7402细胞周期,用细胞同步化的方法 ,即与G2期阻滞药物噻氨酯哒唑(nocodazole)联合应用,以间接反映MR1 siRNA对肿瘤细胞周期的影响.Western blot法检测Cyclin D1蛋白.结果 (1)300 nmol/L MR1 siRNA处理BEL-7402细胞24 hA,MR1基因的mRNA水平明显降低.(2)经siRNA处理后,BEL-7402细胞存活细胞数明显下降,细胞生长速度明显减慢,集落形成率显著下降,Cyclin D1表达水平明显降低.(3)MR1 siRNA与nocodazole联合处理BEL-7402细胞后,G2期细胞比例显著减少,而G1期细胞明显增多.结论 MR1基因与人肝癌BEL-7402细胞增殖相关,抑制MR1表达,能够引起细胞的增殖抑制,其作用机制与诱导细胞的G1期阻滞有关.
目的 研究MR1基因對肝癌細胞增殖的影響及機製.方法 化學閤成MRI siRNA,用脂質體lipofectamine2000轉染肝癌細胞繫BEL-7402細胞,RT-PCR檢測MR1 siRNA基因沉默效果.用SRB法、集落形成法和生長麯線法檢測MR1 siRNA對BEL-7402細胞增殖的影響.流式細胞術檢測BEL-7402細胞週期,用細胞同步化的方法 ,即與G2期阻滯藥物噻氨酯噠唑(nocodazole)聯閤應用,以間接反映MR1 siRNA對腫瘤細胞週期的影響.Western blot法檢測Cyclin D1蛋白.結果 (1)300 nmol/L MR1 siRNA處理BEL-7402細胞24 hA,MR1基因的mRNA水平明顯降低.(2)經siRNA處理後,BEL-7402細胞存活細胞數明顯下降,細胞生長速度明顯減慢,集落形成率顯著下降,Cyclin D1錶達水平明顯降低.(3)MR1 siRNA與nocodazole聯閤處理BEL-7402細胞後,G2期細胞比例顯著減少,而G1期細胞明顯增多.結論 MR1基因與人肝癌BEL-7402細胞增殖相關,抑製MR1錶達,能夠引起細胞的增殖抑製,其作用機製與誘導細胞的G1期阻滯有關.
목적 연구MR1기인대간암세포증식적영향급궤제.방법 화학합성MRI siRNA,용지질체lipofectamine2000전염간암세포계BEL-7402세포,RT-PCR검측MR1 siRNA기인침묵효과.용SRB법、집락형성법화생장곡선법검측MR1 siRNA대BEL-7402세포증식적영향.류식세포술검측BEL-7402세포주기,용세포동보화적방법 ,즉여G2기조체약물새안지달서(nocodazole)연합응용,이간접반영MR1 siRNA대종류세포주기적영향.Western blot법검측Cyclin D1단백.결과 (1)300 nmol/L MR1 siRNA처리BEL-7402세포24 hA,MR1기인적mRNA수평명현강저.(2)경siRNA처리후,BEL-7402세포존활세포수명현하강,세포생장속도명현감만,집락형성솔현저하강,Cyclin D1표체수평명현강저.(3)MR1 siRNA여nocodazole연합처리BEL-7402세포후,G2기세포비례현저감소,이G1기세포명현증다.결론 MR1기인여인간암BEL-7402세포증식상관,억제MR1표체,능구인기세포적증식억제,기작용궤제여유도세포적G1기조체유관.
