新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
3期
651-656
,共6页
简子健%苗中秋%马素贞%谷思燚
簡子健%苗中鞦%馬素貞%穀思燚
간자건%묘중추%마소정%곡사일
牛环形泰勒虫%Tams1基因%表达载体构建%免疫印迹法
牛環形泰勒蟲%Tams1基因%錶達載體構建%免疫印跡法
우배형태륵충%Tams1기인%표체재체구건%면역인적법
研究采用PCR 方法从焦虫病患牛的全血基因组中扩增得到846 bp 的Tams1 基因片段,将其克隆至真核表达载pcDNA3.1(+),构建Tams1基因的真核表达质粒.经测序验证后, 将Tams1基因的真核表达质粒尾静脉注射小白鼠进行Tams1 基因的瞬时表达.取接种小鼠的肝脏提取总RNA,采用RT-PCR 扩增目的条带;用重组质粒pcDNA3.1(+)-Tams1 皮下注射免疫小白鼠4 次后,进行免疫抗体检测.试验结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1含有完整的Tmas1基因片段.用该重组质粒免疫小鼠56 d后,小鼠血清中抗重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1的抗体效价可达1∶12 000以上,说明该重组质粒具有很强的抗原性.经Western-blot检验可得到抗原-抗体复合物产生的特异性条带,说明该重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1具有免疫原性.
研究採用PCR 方法從焦蟲病患牛的全血基因組中擴增得到846 bp 的Tams1 基因片段,將其剋隆至真覈錶達載pcDNA3.1(+),構建Tams1基因的真覈錶達質粒.經測序驗證後, 將Tams1基因的真覈錶達質粒尾靜脈註射小白鼠進行Tams1 基因的瞬時錶達.取接種小鼠的肝髒提取總RNA,採用RT-PCR 擴增目的條帶;用重組質粒pcDNA3.1(+)-Tams1 皮下註射免疫小白鼠4 次後,進行免疫抗體檢測.試驗結果錶明重組質粒pcDNA3.1(+)- Tams1含有完整的Tmas1基因片段.用該重組質粒免疫小鼠56 d後,小鼠血清中抗重組質粒pcDNA3.1(+)- Tams1的抗體效價可達1∶12 000以上,說明該重組質粒具有很彊的抗原性.經Western-blot檢驗可得到抗原-抗體複閤物產生的特異性條帶,說明該重組質粒pcDNA3.1(+)- Tams1具有免疫原性.
연구채용PCR 방법종초충병환우적전혈기인조중확증득도846 bp 적Tams1 기인편단,장기극륭지진핵표체재pcDNA3.1(+),구건Tams1기인적진핵표체질립.경측서험증후, 장Tams1기인적진핵표체질립미정맥주사소백서진행Tams1 기인적순시표체.취접충소서적간장제취총RNA,채용RT-PCR 확증목적조대;용중조질립pcDNA3.1(+)-Tams1 피하주사면역소백서4 차후,진행면역항체검측.시험결과표명중조질립pcDNA3.1(+)- Tams1함유완정적Tmas1기인편단.용해중조질립면역소서56 d후,소서혈청중항중조질립pcDNA3.1(+)- Tams1적항체효개가체1∶12 000이상,설명해중조질립구유흔강적항원성.경Western-blot검험가득도항원-항체복합물산생적특이성조대,설명해중조질립pcDNA3.1(+)- Tams1구유면역원성.