中国男科学杂志
中國男科學雜誌
중국남과학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANDROLOGY
2009年
9期
13-16
,共4页
陈厚仰%汤育新%文甲明%尹光明%刘志中%肖小旺
陳厚仰%湯育新%文甲明%尹光明%劉誌中%肖小旺
진후앙%탕육신%문갑명%윤광명%류지중%초소왕
恒河猴%睾丸%基因文库%SMART技术
恆河猴%睪汍%基因文庫%SMART技術
항하후%고환%기인문고%SMART기술
目的 运用SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库.方法 提取恒河猴睾丸组织总RNA并分离出 mRNA,用clontech公司SMARTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得全长cDNA双链;经SfiI酶切、层析柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB连接后电转化及铺板,建成原始文库.结果 经鉴定,原始文库为2.5×106个重组子,扩增后文库滴度为4.5 X 109CFU/mL.重组率为100%,平均插入片段为1.6kb.结论 已构建文库质量较高,为进一步筛选、克隆睾丸特异表达基因奠定了基础.
目的 運用SMART技術構建恆河猴睪汍組織全長cDNA文庫.方法 提取恆河猴睪汍組織總RNA併分離齣 mRNA,用clontech公司SMARTMcDNA文庫構建試劑盒反轉錄閤成第一鏈cDNA,LD-PCR擴增穫得全長cDNA雙鏈;經SfiI酶切、層析柱分離後,500bp以上的片段與pDNR-LIB連接後電轉化及鋪闆,建成原始文庫.結果 經鑒定,原始文庫為2.5×106箇重組子,擴增後文庫滴度為4.5 X 109CFU/mL.重組率為100%,平均插入片段為1.6kb.結論 已構建文庫質量較高,為進一步篩選、剋隆睪汍特異錶達基因奠定瞭基礎.
목적 운용SMART기술구건항하후고환조직전장cDNA문고.방법 제취항하후고환조직총RNA병분리출 mRNA,용clontech공사SMARTMcDNA문고구건시제합반전록합성제일련cDNA,LD-PCR확증획득전장cDNA쌍련;경SfiI매절、층석주분리후,500bp이상적편단여pDNR-LIB련접후전전화급포판,건성원시문고.결과 경감정,원시문고위2.5×106개중조자,확증후문고적도위4.5 X 109CFU/mL.중조솔위100%,평균삽입편단위1.6kb.결론 이구건문고질량교고,위진일보사선、극륭고환특이표체기인전정료기출.
