CAJ | 학술논문

目的探讨c-Met shRNA表达载体对人黑素瘤A375细胞增殖、侵袭能力的影响.方法以pGenesil-1质粒为载体,以c-Met为靶基因,构建shRNA表达载体,并将其转染至体外培养的人黑素瘤A375细胞中.倒置相差显微镜下观察经干扰后瘤细胞的形态学变化;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测转染细胞c-Met基因和蛋白的表达水平;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测转染后细胞的生长活力;Transwell小室法测定转染细胞体外侵袭能力.结果构建了pGenesil-1-c-Met shRNA重组质粒,并成功转染A375细胞.转染后A375细胞缩小,变圆.RT-PCR显示转染后c-Met mRNA的表达显著降低,以48h为著,下降近64%;Western blot证实转染后蛋白的表达下降近65%;MTI法显示细胞的活力降低为(68.25±4.4)%;Transwell小室测定转染细胞体外侵袭能力明显下降.结论 pGenesil-1-c-Met shRNA重组质粒明显下调c-Met在黑素瘤细胞中的表达,并抑制肿瘤细胞增殖及其侵袭能力.
목적 탐토c-Met shRNA표체재체대인흑소류A375세포증식、침습능력적영향.방법 이pGenesil-1질립위재체,이c-Met위파기인,구건shRNA표체재체,병장기전염지체외배양적인흑소류A375세포중.도치상차현미경하관찰경간우후류세포적형태학변화;채용반전록취합매련반응(RT-PCR)화Western blot법분별검측전염세포c-Met기인화단백적표체수평;사갑기우담서염미량매반응비색법(MTT법)검측전염후세포적생장활력;Transwell소실법측정전염세포체외침습능력.결과 구건료pGenesil-1-c-Met shRNA중조질립,병성공전염A375세포.전염후A375세포축소,변원.RT-PCR현시전염후c-Met mRNA적표체현저강저,이48h위저,하강근64%;Western blot증실전염후단백적표체하강근65%;MTI법현시세포적활력강저위(68.25±4.4)%;Transwell소실측정전염세포체외침습능력명현하강.결론 pGenesil-1-c-Met shRNA중조질립명현하조c-Met재흑소류세포중적표체,병억제종류세포증식급기침습능력.