CAJ | 학술논문

AhNCED1是干旱胁迫下调控花生ABA生物合成的关键基因.以pCAMBIA1301为基本双元表达载体,分别构建CaMV 35S启动子和拟南芥AtNCED3基因启动子(AtNcED3p)驱动花生AhNCED1基因的2个植物双元表达载体p35S::ORF和pAtNCED3p::ORF,通过根癌农杆菌介导法将上述两个表达载体分别转化野生型和129808/nced3突变体拟南芥,经潮霉素筛选和PCR鉴定分别获得35S::ORF-WT和A3p::ORF-B08转基因植株,RT-PCR证实花生AhNCED1基因已在转基因植株中稳定表达,并对野生型、129808/nced3突变体和转基因拟南芥进行外源ABA敏感性和耐渗透胁迫能力分析.结果表明,129B08/nced3突变体对外源ABA的敏感性下降,而花生AhNCED1基因在拟南芥中的异位表达提高了对外源ABA的敏感性.在山梨醇胁迫下,129B08/nced3突变体种子的相对萌发率明显低于野生型的,而A3p::ORF-B08转基因拟南芥种子的相对萌发率与野生型的相当,显著高于129B08/nced3突变体的,且300 mmol L-1山梨醇胁迫下,35S::ORF-WT转基因拟南芥种子的相对萌发率明显高于野生型的.在300 mmol L-1山梨醇胁迫下,129B08/nced3突变体幼苗叶片高度黄化,根的形成和幼苗生长受到严重抑制,而A3p::ORF-B08转基因突变体与野生型相似,叶片仅轻度黄化,幼苗生长势良好;35S::ORF-WT转基因植株幼苗生长未受明显影响.这些结果说明,拟南芥129808/nced3突变体对山梨醇诱导的非离子渗透胁迫有超敏性,异位表达花生AhNCED1基因能恢复该突变体对山梨醇的超敏性,提高拟南芥的耐渗透胁迫能力.
AhNCED1시간한협박하조공화생ABA생물합성적관건기인.이pCAMBIA1301위기본쌍원표체재체,분별구건CaMV 35S계동자화의남개AtNCED3기인계동자(AtNcED3p)구동화생AhNCED1기인적2개식물쌍원표체재체p35S::ORF화pAtNCED3p::ORF,통과근암농간균개도법장상술량개표체재체분별전화야생형화129808/nced3돌변체의남개,경조매소사선화PCR감정분별획득35S::ORF-WT화A3p::ORF-B08전기인식주,RT-PCR증실화생AhNCED1기인이재전기인식주중은정표체,병대야생형、129808/nced3돌변체화전기인의남개진행외원ABA민감성화내삼투협박능력분석.결과표명,129B08/nced3돌변체대외원ABA적민감성하강,이화생AhNCED1기인재의남개중적이위표체제고료대외원ABA적민감성.재산리순협박하,129B08/nced3돌변체충자적상대맹발솔명현저우야생형적,이A3p::ORF-B08전기인의남개충자적상대맹발솔여야생형적상당,현저고우129B08/nced3돌변체적,차300 mmol L-1산리순협박하,35S::ORF-WT전기인의남개충자적상대맹발솔명현고우야생형적.재300 mmol L-1산리순협박하,129B08/nced3돌변체유묘협편고도황화,근적형성화유묘생장수도엄중억제,이A3p::ORF-B08전기인돌변체여야생형상사,협편부경도황화,유묘생장세량호;35S::ORF-WT전기인식주유묘생장미수명현영향.저사결과설명,의남개129808/nced3돌변체대산리순유도적비리자삼투협박유초민성,이위표체화생AhNCED1기인능회복해돌변체대산리순적초민성,제고의남개적내삼투협박능력.